(分子生物学)第十章外源基因表达与基因工程药物.ppt

* * * * ?噬菌体和粘性质粒载体常用来构建基因组文库，构建cDNA文库和克隆较小DNA片段常用pUC系列等质粒，M13噬菌体则用于克隆一些待测的DNA序列。 * * * 质粒的分子量一般为106~108 ，小型质粒的长度一般为1.5~15Kb。 遗传标志，如：抗生素的抗性基因，?-半乳糖苷酶基因（lac Z）等。 * 质粒的分子量一般为106~108 ，小型质粒的长度一般为1.5~15Kb。 遗传标志，如：抗生素的抗性基因，?-半乳糖苷酶基因（lac Z）等。 * 许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β- 半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146个氨基酸的编码 信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS），它 并不破坏读框，宿主细胞可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列; 它们同时存在时，可形成具有酶学活性的蛋白质 。LacZ+细菌 在诱导剂IPTG的作用下，在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌 落，因而易于识别。然而，当外源DNA插入到质粒的多克隆位 点后，几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段，使得 带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，又称 为蓝白斑筛选 。 * * * * * * * 蛋白分离层析系统 分部收集器 记录仪 蠕动泵 梯度混合仪 蛋白质产物