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LAMP技术在实际检测中的应用
LAMP技术在实际检测中的应用 吴旭东 2015年3月27日 材料: 口岸大豆植株残体(多为大豆豆荚、豆杆和大豆) 纯水 20% 吐温 200目钢筛、250ml三角瓶、高速离心管、试管架 MO BIO PowerSoil (12888-50) 美国强力土壤基因组提取试剂盒 操作步骤: 随机取样:大豆植株残体样本在盘子内摇晃混匀五点取样,选取之后的样本下一步备用。 样本的洗涤:取大豆植株残体材料10 g 于250 ml 三角瓶中,加入200 ml 纯水后,再加入3~5 滴 20% 吐温,用封口膜封口后,置于 200 rpm 摇床中摇 20 min 滤液的收集: 200 目钢筛过滤,用纯水少量多次清洗滤渣,以便残体中携带的孢子和菌丝充分过滤。为了避免交叉污染,在每次操作后,均要认真清洗钢筛,方可过滤其他材料 操作步骤: 4. 离心收集沉淀:滤液分装到高速离心管中,配平后用 6500 rpm 离心 5 min,分多次离心,直至全部离完。 每次离心结束后,慢慢将上清丢弃,保留底部土壤沉淀 5. 沉淀物处理:将沉淀置于37 °C 恒温箱中晾干 6. 沉淀物总基因组的提取:得到的土壤沉淀,可用美国 MOBIO公司的土壤微生物DNA强力提取试剂盒 PowerSoil? DNA Isolation Kit 进行提取 谢谢聆听 ·
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