BAPTA,AM-钙掩蔽.docVIP

BAPTA, AM CAS#：126150-97-8 化学名：钙螯合剂BAPTA, AM? 结构式： 分子式：C34H40N2O18 分子量：764.68 性质： 1. 外观：白色粉末 2. 纯度：≥95%（HPLC） 3. 产品描述： BAPTA, AM是一种钙选择性螯合剂。它的特征参数为logKCa=6.97，logKMg=1.77。它基本的螯合单位和EDTA类似，只是两个脂肪氮被芳香氮所替代。因此，BAPTA在生理pH下不会被质子化。BAPTA的pKa3为5.47，pKa4为6.36。这个特点显示了去质子化的步骤并不包含在Ca的螯合步骤中。由于不受质子的干扰，它的螯合率比EGTA要高得多。BAPTA, AM是BAPTA的乙酰甲酯衍生物，通过AM法，能被轻易负载到细胞中。BAPTA, AM有助于调控细胞内钙浓度。 4．使用方法 （1） 溶解方法 将25mg BAPTA, AM加入到 654μL无水DMSO中，配制50 mM stock solution。 * 保存stock solution的方法和保存时间： ?? 由于AM体遇水容易分解，所以我们推荐现配现用。 ?? 使用无水DMSO，在冷冻的条件下，可以保存约1～2个月。 （2） 使用方法 稀释stock solution，添加细胞。 稀释浓度：少的 6～8 μM，多的50 μM * 由于BAPTA, AM是非水溶性，稀释时先再添加DMSO后，添加水溶液（特别是使用培养液时）。不然的话，BAPTA, AM的结晶有可能出来。关于添加的DMSO的量，考虑细胞的毒性，应该低于1%以下。 * 由于BAPTA, AM是非水溶性，所以稀释时慢慢添加水溶液。 * 如果不想再添加DMSO的话，也有添加Pluoronic F127的方法。添加Pluoronic F127时，先添加到母液后，使用PBS等水溶液稀释。 * stock solution和PBS等水溶液混合时，将stock solution添加到PBS等水溶液里。 ???例1) 10 μM，使用2 μL 50 mM BAPTA, AM stock solution ???????? 再添加的DMSO量：0μL（DMSO最终浓度：0.02 %） ???????? 添加的水溶液的量：10 mL ???? 　　方法：2 μL BAPTA, AM stock solution +10 mL PBS等水溶液 ???例2) 25 μM，使用5 μL 50 mM BAPTA, AM stock solution ???????? 再添加的DMSO量：95 μL（DMSO最终浓度：1%） ???????? 添加的水溶液的量：10 mL ???? 　　方法：(1) 5 μL BAPTA, AM stock solution + 95 μL DMSO ????????????????? ?(2) 10 mL PBS等水溶液 + 100μL 的(1) ?* 关于细胞的量，不同的细胞使用不同的细胞量。一般来说，Fura-2, AM及Fluo-3, AM一样的量。 论文里面有如下的条件，请参考。 ???例1) 1.75×10-4 cells/cm2，25 μM BAPTA, AM 培养时间：20～60 分钟 * 如果培养时间太长的话，很多BAPTA, AM进入细胞内，对细胞不好（毒性高）。 储存条件：-20℃干燥避光保存 北京泛博生物化学有限公司 联系人：肖珣 电话：010 传真：010 E-mail：marketing@