第八章-蛋白分选与膜泡运输1.pptVIP

蛋白质分选与膜泡运输Protein Sorting and Vesicular Transport;教学安排;;§1 细胞内蛋白质的分选;一、信号肽(Signal peptide); 信号序列（signal sequence） N-端16-26个氨基酸残基 无特异性 信号斑（signal patch） 存在于完成折叠的蛋白质中 构成信号斑的信号序列之间可以不相邻;signal sequence and signal patch;一、信号肽(Signal peptide); 1975年Blobel和sabatini等提出了信号假说（signal hypothesis），即分泌性蛋白N端作为序列信号肽（signal sequence或signal peptide），指导分泌性蛋白到内质网膜上合成，在蛋白合成结束前信号肽被切除。信号识别颗粒(SRP)和内质网膜上的信号识别颗粒的受体（停泊蛋白,DP）等因子协助完成这一过程。;一些典型的分选信号;信号序列（signal sequence）：存在于蛋白质一级结构上的线性序列，通常由15-60个氨基酸残基组成，有些信号序列在完成蛋白质的定向转移后被信号肽酶（ signal peptidase）切除；通常信号序列对所引导的蛋白质没有特异性要求。 信号斑（signal patch）：存在于完成折叠的蛋白质中，构成信号斑的信号序列之间可以不相邻，折叠在一起构成蛋白质分选的信号。 每一种信号序列决定特殊的蛋白质转运方向。; 分泌性蛋白N端序列为信号肽，指导分泌蛋白到内质网上合成，在蛋白合成结束之前信号肽被切除。信号识别颗粒和内质网膜上的信号识别颗粒的受体（停泊蛋白）等因子协助完成这一过程。;二、蛋白分选转运的基本途径与类型;（二）信号肽与共翻译;Date;二、蛋白分选转运的基本途径与类型;三、跨膜转运（transmembrane transport）;膜泡运输是蛋白分选的一种特有方式 膜泡运输还形成了细胞内膜脂流动(membrane flow) 转运膜泡出芽发生在特定区域：蛋白信号与受体结合部位 转运泡在细胞内沿微管或微丝运输：膜泡运输有关的马达蛋白有3类 动力蛋白（dynein）：趋向微管负端 驱动蛋白（kinesin）：趋向微管正端 肌球蛋白（myosin）：趋向微丝的正极;Date;一、衣/包被类型;三种包被小泡的功能;（一）网格/笼形蛋白衣被小泡;Clathrin coated vesicles;Selective transport by clathrin coated vesicles;当衣被小泡形成时，可溶性蛋白dynamin聚集成一圈围绕在芽的柄部，使柄部的膜尽可能地拉近（小于1.5nm??，导致膜融合，pinch off衣被小泡。 ;（二）COP I衣被小泡;COP I Vesicles;Cop I and II Vesicles;Lys-Asp-Glu-Leu（KDEL）;（三）COPⅡ衣被小泡;COP II Vesicles;COPII Coated vesicle;二、衣被形成;ER上形成COPII小泡时，SAR1交换GDP/GTP而激活。 激活的SAR1暴露出脂肪酸链尾巴，插入ER膜，促进衣被蛋白的核化和组装。 SAR1可激活磷脂酶D，将一些磷脂水解，使衣被蛋白牢固地结合在膜上。 当小泡从膜上释放后，衣被很快就解体。;Coat assembly;三、膜泡运输的定向机制;SNAREs;SNAREs in vesicle transport;神经细胞中，SNAREs负责突触小泡的停泊和融合。破伤风毒素和肉毒素能选择性地降解SNAREs，阻断神经传导。 病毒融合蛋白的工作原理与SNAREs相似，介导病毒与宿主质膜的融合。 ;HIV fusion protein;（二）Rabs;Rabs in docking;复习思考题; 在游离核糖体上起始合成 SRP结合信号肽后暂停翻译 SRP与RER上的DP结合 信号肽与移位子结合，打开孔道 SRP脱离，肽链合成重启 信号肽被切除、降解 肽链合成终止，核糖体释放，肽链折叠;开始转移序列(start transfer sequence) 停止转移锚定序列(internal stop-transfer anchor sequence,STA) 内在信号锚定序列(internal signal-anchor sequence, SA);（二）线粒体蛋白质的跨膜运送;含有较为丰富的带正电荷的碱性氨基酸(特别是精氨酸)，穿插在不带电荷的氨基酸序列之间，对牵引蛋白质跨膜具有重要作用 基本不含带负电荷的酸性氨基酸 序列中羟基氨基酸(尤其是丝氨酸)的含量较高 整个前导序列可形成既具亲水性又具疏水性的两性?-螺旋 凭藉外