[生物学]遗传学第八章.pptVIP

第八章 细菌和病毒的遗传学分析 一、细菌和病毒在遗传研究中的优越性 1.世代周期短，繁殖世代所需时间短； 2.便于管理和进行化学分析 3.便于研究基因的突变 4.便于研究基因的作用 5.便于重组基因的研究 6.便于研究基因的结构、功能及调控机制 7.便于进行遗传操作 第一节 细菌与病毒的遗传分析 一、接合 二、转化 三、性导 四、转导 一、细菌的接合现象 (一)、接合现象的发现和证实 (二)、F因子及其在杂交中的行为 (三)、中断杂交试验作图 (一)、接合现象的发现和证实 1946年，黎德伯格和塔特姆大肠杆菌杂交试验： 材料：大肠杆菌(Escherichia coli)K12菌株的两个营养缺陷型品系： A—甲硫氨酸缺陷型met-和生物素缺陷型bio-； B—苏氨酸缺陷型thr-和亮氨酸缺陷型leu-。 方法： 将A、B混和，在基本培养基(固体)上涂布培养。 结果： 平板上长出原养型菌落(++++)。 黎德伯格和塔特姆接合试验 转化作用及其排除 把品系A的培养液经加热灭菌，加入到B品系的培养物中，未得到原养型菌落；表明原养型菌落可能不是由转化作用产生。 1950年，戴维斯的U型管试验(结果没有得到原养型细菌)； 实验结论：细胞直接接触是原养型细菌产生的必要条件。 接合现象的发现和证实 经过上述分析可以认为： 在黎德伯格和塔特姆的试验中，发生了一种不同于转化的遗传重组方式，称之为接合。 1953年，海斯研究表明： 大肠杆菌两种不同菌株(品系)接合过程中遗传物质的转移是单向的；从而认为大肠杆菌存在两种类型品系：雌性与雄性分别作为接合过程中遗传物质的供体与受体。 接合： 遗传物质从供体(donor)转移到受体(receptor)的重组过程。 杂交时的贡献 海斯发现，两个菌株在杂交时贡献不一样 A (strr)与B (strs) A (strs)与B (strr) 在不含str的基本培养基上都能得到菌落 但在含str的基本培养基上，只有A(strs)与B(strr)能得到菌落，说明遗传物质是单向转移的过程 (二)、F因子及其在杂交中的行为 1. F因子： 海斯等进一步研究发现，大肠杆菌在接合中作供体的能力受细胞内一种致育因子(fertility factor, F因子; sex factor, 性因子)控制。 F因子的化学本质是DNA，可以自主状态存在于细胞质中或整合到细菌的染色体上。 F因子可以在细菌细胞间进行转移并传递遗传物质。 F因子的结构 F＋与Hfr比较 相同点 1、都能和F－ 产生杂交后代 2、杂交时都是通过接合管与受体相连 3、用高剂量链霉素处理后不影响杂交，说明他们都是作为供体 不同点 1、重组率不同， F＋（ 10－7 ）， Hfr（ 10－ 2） 2、 Hfr ×F － → F － ， F＋ × F － → F＋ 细菌遗传重组的特点 1、只有偶数次的交换才能保持细菌染色体的完整性，产生有活性的重组子 2、偶数次的交换的得到的重组子只有一种类型，相反重组子是一个线状片段，不能复制，随着细胞分裂而丢失 三、性导 性导与F′因子 噬菌体的遗传分析 1、增殖 （1）烈性噬菌体：这种噬菌体感染宿主细胞后就会进入裂解反应，使宿主细胞裂解 （2）温和噬菌体：这种噬菌体感染宿主细胞后具有裂解和溶源两种发育途径 （3）原噬菌体：整合状态的噬菌体 （4）溶源菌：含有原噬菌体 2、基因重组 （1）双重感染：两个基因型不同的噬菌体，同时感染一个宿主细胞的现象 * * * * 在原核生物中，接合是指遗传物质从供体—“雄性”转移到受体—“雌性”的过程。 ⑴ F 因子：又称致育因子，由共价环状闭合双链DNA构成，全长94.5Kb，约为大肠杆菌环状染色体的2%，以游离状态存在与细胞质中。 携带F因子的菌株称为供体菌或雄性，用F＋表示。 未携带F因子的菌株为受体菌或雌性，用F－表示。 F＋与F－菌 （1）有F因子的细菌称为F＋，细菌增殖时可把F 因子传递给后代细胞（通过自主复制）。 （2）没有F因子的细菌称为F－，F＋细菌经吖啶 橙处理而丢失，成为F－。F因子一经丢失， 细胞中便不再出现； （3）F＋可以和F－杂交，而不能和F＋杂交； （4）F＋菌与F－菌混合（即F＋×F－）1小时后，约95%的F－菌转变为F＋菌，而原来的F＋仍然保留有F因子。而且，可以10－7频率获得重组体后代。 （1）滚环复制；（2）随机中断；（3）F因子的致育区（转移区）在最末端，因而很难转移到F－ 。 （三）高频重组(Hfr) 1951年Cavalli发现：用氮芥处理F＋, 然后将处理后的F＋与F－杂交，产生高频率的重组子（10－4）。 1954年 ，海斯 也分离了Hfr品系，发现： (1)