菌种与种子扩大培养推荐.ppt

3、一级种子 培养基：（葡萄糖、乳糖、蔗糖）、玉米浆 目的：长菌体 培养条件：27℃，40小时 接种量：200亿孢子/吨 4、二级种子 培养基：同上 培养条件：27℃、10-14小时 接种量：10% 种子的质量要求 菌丝长稠呈丝状、菌丝团很少，有中小空孢，处于Ⅲ—Ⅳ期 青霉素发酵菌丝体的生长共分为6个期，1-4为年青期，4-6期合成青霉素的能力最强 种龄 种龄是指种子罐中培养的菌体开始移入下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。 种龄短：菌体太少；种龄长：易老化。 原则：对数生长期末，细胞活力强，菌体浓度相对较大，但是最终由实验结果定。 接种量的确定 移入种子的体积 接种量＝ ————————— 接种后培养液的体积 过大过小都不好，最终以实践定，如大多数抗生素为7-15%。但是一般认为大一点好。 双种：两个种子罐接种到一个发酵罐中。 倒种：一部分种子来源于种子罐，一部分来源于发酵罐。 发酵级数的确定 一般由菌丝体培养开始计算发酵级数，但有时，工厂从第一级种子罐开始计算发酵级数 确定依据： 发酵规模、菌体生长特性、接种量 级数大，难控制、易染菌、易变异，难管理，一般2-4级 谷氨酸的三级发酵： 一级种子（摇瓶）→二级种子 （小罐）→发酵 青霉素的三级发酵： 一级种子 （小罐）→二级种子（中罐）→发酵 小节： 常见工业微生物的种类和用途 生产菌种的来源与保护 控制种子质量的基本方法和手段 问题： 在生产过程中如何控制种子质量？ End Thanks! 第二章 培养基及其制备 本章内容简介： 培养基原材料 淀粉水解糖的制备 糖蜜前处理 石油代粮发酵微生物工程的特征 第一节 培养基的原材料 一、培养基的营养成分及用途 光 光能自养 氢、硫、氨 自养菌 Ⅰ.能源 亚硝酸盐、亚铁盐 化能自养 碳水化合物等有机物 石油天然气和石油化工产品 功能：生长、繁殖需要； 异养菌 碳酸气 淀粉水解糖、糖蜜、亚硫酸盐纸浆废液等 石油、正构石蜡、天然气 醋酸、甲醇、乙醇等石油化工产品 功能：提供能量、构成菌体、代谢产物的物质基础； 豆饼或蚕蛹水解液、味精废液 Ⅲ.氮源 玉米浆、酒糟水等有机氮 尿素、硫酸铵、氨水、硝酸盐等无机氮、气态氮 功能：构成菌体、含氮代谢物； Ⅱ.碳源 磷酸盐、钾盐、钙盐等矿物盐 Ⅳ.无机盐 铁、锰、钴等微量元素 功能：构成菌体，参与酶的组成，维持酶活性，调节渗透压，调节pH值，维持氧化还原电位； Ⅴ.特殊生长因子：硫胺素、生物素、对氨基苯甲酸、肌醇等 功能：酶的辅助部分，维持生命活动； Ⅵ.水分 功能：生化反应均在水溶液中进行 二、培养基的类型 1.依营养物质的来源分类 ①天然培养基；（麦芽汁、玉米粉、麸皮、锯末等） ②合成培养基； （高氏培养基、察氏培养基等 ） ③半合成培养基； （牛肉膏蛋白胨、土豆葡萄糖培养基） 2.依培养基制成的形式分： ①液体培养基； ②固体培养基； 3.依培养基主要成分和使用目的来分 ①基础培养基 ②完全培养基 ③鉴别培养基 ④选择培养基 4.根据生产工艺来分 ①孢子培养基 ②种子培养基 ③发酵培养基 附：培养基配方举例 三、发酵培养基的选择 发酵培养基的用途与要求、成分、配比经实验确定，配制时兼顾原料来源、成本及工艺管理； 四、原料转换及意义 发酵培养基中所用原材料，大部分属于粮食、油脂、蛋白质和农用肥料，其中山芋粉、玉米粉、淀粉、糊精、麦芽糖等都是可供人畜食用的粮食、油料或以粮食为原料的产品；我国人口众多，发酵产品品种和产量与日俱增，每年都消耗大量粮食、油料和蛋白质原料。 随着原料的转换，不仅要选育与原料转换相适应的菌种，同时发酵的控制方法也不相同。 第二节 淀粉水解糖的制备 一、淀粉的性质： 颗粒状态 来源，纯度 淀粉转化为葡萄糖：增重11%，还原基团 甜味 呈味物质 色泽 二、淀粉水解糖的制备方法 1.酸解法 2.酶解法 3.酸酶结合法 ①酸酶法 ②酶酸法 不同的制糖工艺生产的糖液质量差别很大