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试验用品光学显微镜-江苏师范大学
课件说明 本课件是为本院的细胞生物学教学制作的,适用于生物科学、生物技术专业的本科生实验教学。 本课件结合实验条件与学生的实际情况,内容包括一些常用的细胞生物学基本实验,如特殊显微镜的使用、显微摄影技术、细胞化学技术、细胞组分的分级分离、细胞染色体技术、细胞培养、细胞融合、细胞生理活动等。课件除对实验原理、过程作简明的文字阐述外,还包含相当的图表,使学生直观地了解并掌握有关的实验技术原理和操作方法。 本课件的使用有助于培养学生动手实践、观察分析和解决问题的能力。 细胞生物学实验 常用实验动物的了解和解剖器械的使用 一、常用实验动物 细胞生物学实验中,除应用培养细胞外,最常用的动物是蟾蜍和小白鼠,下面对其特点及基本处置做一简单的介绍。 蟾蜍 蟾蜍是两栖类动物,由于其取材方便,常用于各种实验。其细胞较哺乳类动物的细胞大得多,因此常用于观察细胞形态的实验。 1.雌雄鉴别 通常雄性蟾蜍较雌性的为小,且在其前肢的l~3趾基部有被称为婚垫的黑疣。 2.捉拿及处死方法: 常用捣髓法处死蟾蜍,即用解剖针捣毁其脑组织和脊髓。具体方法是,左手握住蟾蜍的身体和四肢,使其腹部贴着掌心,食指压住蟾蜍头部前端使其尽量腹屈。在头与躯干之间可触及一凹陷(即枕骨大孔所在处),右手持解剖针直插入此凹陷约l~2mm,随即将针尖转向头侧插入颅腔捣毁脑组织。然后将解剖针抽回并转向尾侧刺入脊椎管内捣毁其脊髓。如此直至其四肢松软,呼吸消失为止。 小白鼠 小白鼠是哺乳动物,是最为常用的实验动物。 1.捉拿方法: 将小白鼠放在鼠笼盖铁网上,用右手持其尾巴向后拉,小鼠则会尽力向前蹬。用左手的拇指和食指抓住其头顶部皮肤,然后用左手小指与手掌之间夹住其尾巴。 2.处死方法: 处死应以安乐死为原则,即使之无痛苦而迅速死亡。常用的方法有颈椎脱位法,断头法和二氧化碳吸入法等。断头法需用特殊的断头器,二氧化碳吸入法则将小鼠放入盛有二氧化碳的容器内即可。颈椎脱位法的具体方法是:左手拇指和食指按住小白鼠的头部,左手捉住其尾巴迅速向后猛拉,使其颈椎脱位而立即死亡。 3.给药方法: 小自鼠的给药途径有经口给药、腹腔内注射、尾静脉注射、皮下注射、皮内注射和肌肉注射等。我们常用的是腹腔注射。具体方法是:左手捉住小鼠(如前所述),在其腹正中线稍外侧(避开膀胱和血管)用酒精消毒后,首先将注射针头向头部方向刺入皮下,进针1~2mm后,再以45°角刺穿腹部肌肉而进入腹腔(刺穿腹肌时有一落空感)。针头刺入腹腔后切勿左右摆动,以免损伤肠管或肝脏。注意每次注入的液体量应为0.1~0.2ml/10克体重。 二、常用手术器械及操作方法: 1.解剖针:用于挑、刺等。常用来捣髓处死蟾蜍,持法如执笔法。 2.解剖刀(即外科手术刀):用于各种皮肤切口和组织切除等。持法有执弓法与执笔法两种。前者用于较大力量切开较长距离的坚韧的组织,如大动物的皮肤切口等;后者则用于小力量的短距离切开,或分离皮肤和肌肉等。 3.大剪刀:用于剪毛、皮肤、皮下组织和肌肉等。 4.眼科剪刀:用于剪断神经、血管、筋膜等细软组织。 5.眼科镊子:用于提取神经、血管和筋膜等细软组织。 6.钝头镊子:用于提取脏器、组织等。 7.有钩镊子:用于提取皮肤切口等。 细胞生物学实验绘图方法与要求 (一) 生物绘图的要求 具有高度的科学性,不得有科学性错误。形态结构要准确,比例要正确,要求真实感,立体感,精美而美观。 图面要力求整洁,铅笔要保持尖锐,尽量少用橡皮。 绘图大小要适宜,位置略偏左,右边留着注图。 绘图的线条要光滑、匀称,点点要大小一致。 绘图要完善,字体用正楷,大小要均匀,不能潦草。注图线用直尺画出,间隔要均匀,且一般多向右边引出,图注部分接近时可用折线,但注图线之间不能交叉,图注要尽量排列整齐。 绘图完成后在绘图纸上方要写明实验名称、班级、姓名、时间,在图的下方注明图名及放大倍数。 (二) 生物绘图的方法 点点衬阴法:将图形画出后,用铅笔点出圆点,以表示明暗和深浅,给予立体感。在暗处点要密,明处要疏,但要求点要均匀,点点要从明处点起,一行行交互着点,物体上的斑纹描出再点点衬阴,点点衬阴法要求不能用涂抹阴影的方法以代替点点,此点初学者要尤为注意。 轮廓图(左)和细胞图(右) 实验一 普通光学显微镜的结构及其使用 [目的要求] 1、掌握普通光学显微镜的主要构造及其性能; 2、掌握低、高倍镜的正规使用方法,反复练习,观察时保持两眼同时睁开和两手并用。 [实验用品] 光学显微镜、各种动植物玻片标本。 [实验内容和方法] 一、光学显微镜的主要
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