10细胞生物学第十二章 内膜系统 细胞内功能区隔与蛋白质分选PPT.ppt

AA Sequences of ER Signal Peptides SRP受体，内质网膜的整合蛋白，异二聚体，可与SRP特异结合。 停止转移序列，与内质网膜的亲合力很高，阻止肽链继续进入网腔，成为跨膜蛋白。 转位因子，由3-4个Sec61蛋白构成的通道，每个Sec61由3条肽链组成。 Translocation of proteins across ER 蛋白质转入内质网合成的过程： 信号肽与SRP结合→肽链延伸终止→SRP与受体结合→SRP脱离信号肽→肽链在内质网上继续合成→信号肽切除→肽链延伸至终止。 这种肽链边合成边向内质网腔转移的方式，称为co-translation。 Insertion of Transmembrane protein into the ER membrane （二）蛋白质的修饰与加工 包括糖基化、羟基化、酰基化、二硫键形成等，几乎所有内质网上合成的蛋白质最终被糖基化。 糖基化的作用： ①使蛋白质能够抵抗消化酶的作用； ②赋予蛋白质传导信号的功能； ③某些蛋白只有在糖基化之后才能正确折叠。 糖基一般连接在4种氨基酸上，分为2种： N-连接的糖基化：与天冬酰胺残基的NH2连接，糖为N-乙酰葡糖胺。 O-连接的糖基化：与Ser、Thr和Hyp的OH连接，连接的糖为半乳糖或N-乙酰半乳糖胺，在高尔基体上进行。 内质网上进行N-连接的糖基化。糖的供体为核苷糖，如GDP-甘露糖、UDP-N-乙酰葡糖胺。 糖分子首先被糖基转移酶转移到膜上的磷酸长醇分子上，装配成寡糖链。 再被寡糖转移酶转到Asn-X-Ser或Asn-X-Thr的Asn上。 Protein glycosylation in RER Protein glycosylation in RER Protein glycosylation in RER （三）新生肽链的折叠、组装和运输 蛋白质折叠是在hsp70家族的ATP酶的作用下完成的 。 无法正确折叠的蛋白被转入溶酶体降解，约90%的新合成T细胞受体亚单位和Ach受体都被降解，而从未到达靶膜。 COP II介导由ER输出的膜泡运输。 （四）内质网的其它作用 合成磷脂、胆固醇等，经膜泡运输转运至高尔基体、质膜等，或借磷脂转移蛋白（PTP）形成水溶性复合物，转至其他膜上。 解毒，如肝细胞的细胞色素P450酶系。 参与甾体类激素的合成。 使葡糖6-磷酸水解，释放糖至血液中。 储存钙离子，作为细胞内信号物质，如肌质网。 提供酶附着的位点和机械支撑作用。 发现于1855年，1889年，Golgi用银染法，在猫头鹰的神经细胞内观察到了清晰的结构，因此定名为高尔基体。 二、衣被形成 衣被召集GTP酶为G蛋白。包括ARF和SAR 1，调节因子有： 鸟苷酸交换因子（ GEF）； GTP酶激活蛋白（GAP）。 ARF参与高尔基体上clathrin与COP I衣被的形成。 SAR 1参与内质网上COP II衣被的形成。 衣被召集GTP酶存在于细胞质。ER上形成COPII小泡时，SAR1释放GDP，结合GTP而激活。 激活的SAR 1暴露出一条脂肪酸的尾巴，插入ER膜，促进衣被蛋白的核化和组装。 活化的SAR1可激活磷脂酶D，将一些磷脂水解，使衣被蛋白牢固地结合在膜上。 当小泡从膜上释放后，衣被很快就解体。 Coat assembly 三、膜泡运输的定向机制 （一）SNAREs 介导运输小泡与靶膜的融合。 分为v-SNAREs和t-SNAREs。 具有一个螺旋结构域，相互缠绕形成跨SNAREs复合体，将小泡与靶膜拉在一起。 SNAREs SNAREs in vesicle transport 神经细胞中，SNAREs负责突触小泡的停泊和融合。破伤风毒素和肉毒素能选择性地降解SNAREs，阻断神经传导。 病毒融合蛋白的工作原理与SNAREs相似，介导病毒与宿主质膜的融合。 HIV fusion protein SNAREs的分离：由NSF催化，以ATP为能量，，插入几个适配蛋白将SNAREs复合体分开，以便开始下一轮的转运。 （二）Rabs Rabs也叫targeting GTPase，属于G蛋白，起分子开关作用。已知30余种，不同膜上具有不同的Rabs。 Rabs促进和调节运输小泡的停泊和融合。 Rabs还有许多效应因子，帮助运输小泡聚集和靠近靶膜，触发SNAREs抑制因子。 Rabs in docking 四、受体介导的内吞 批量内吞（Bulk-phase endocytosis）：非特异性的摄入细胞外物质，穴样内陷（caveolae）是发生批量内吞的部位。 受体介导的内吞 (receptor mediated endocytosis)是一种选择浓缩机制。LDL、运铁蛋白、生长因子、胰岛素等都通过RME转