CN107459580-CN201610389950-一种利用酵母菌表达含有穿膜肽的寡肽1(EGF)创新制备工艺.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107459580 A (43)申请公布日 2017.12.12 (21)申请号 201610389950.7 (22)申请日 2016.06.06 (71)申请人 易金阳 地址 518000 广东省深圳市罗湖区嘉宝田 花园宝祥阁24C (72)发明人 易金阳　 (51)Int.Cl. C07K 19/00(2006.01) C12P 21/02(2006.01) C07K 1/18(2006.01) C07K 1/16(2006.01) A61K 38/18(2006.01) A61K 38/08(2006.01) A61K 8/64(2006.01) 权利要求书1页 说明书4页 附图1页 (54)发明名称 一种利用酵母菌表达含有穿膜肽的寡肽-1 （EGF）创新制备工艺 (57)摘要 本发明公开了工业化生产含有ELP(Val- Pro-Gly-Xaa-Gly)穿膜肽和寡肽-1(EGF)的融合 蛋白的制备方法，含有它们的组合物和它们的用 途，采用酵母菌通过种子培养，扩大发酵、菌体采 集、破碎、裂解、分离纯化等工艺方法收集含穿膜 肽的寡肽-1融合蛋白。本发明具有方法简单、产 物浓度高、操作成本低等优点，适合工业化生产。 本发明的化合物和组合物可以用作医疗器械耗 材、保健品和化妆品的活性成分或添加剂。 A 0 8 5 9 5 4 7 0 1 N C CN 107459580 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.包含有穿膜肽的寡肽-1(EGF)的融合蛋白。 优选地，ELP(Val-Pro-Gly-Xaa-Gly)穿膜肽位于寡肽-1(EGF)的C-端，优选紧邻寡肽- 1，也可以通过间隔序列与寡肽-1相连。 2.组合物，权利要求包含穿膜肽和寡肽-1的单一或多个组合，任选的，所述组合物还含 有赋形剂、稳定剂、稀释剂；所述组合物是医疗耗材组合物、保健品组合物、化妆品组合物。 3.本发明涉及一种工业化生产含有穿膜肽的寡肽-1(EGF)的制备方法，其特征在于它 包括如下步骤： (1)种子液制备 (2)酵母菌发酵 (3)菌体收集破碎 (4)含穿膜肽的寡肽-1(EGF)融合蛋白纯化。 4.根据权利要求3所述的制备方法，其中所述的分离纯化是采用缓冲液洗涤、离子交 换、凝胶层析的组合方式。 5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于所用裂解液为20mM三羟甲基氨基甲烷、 8M尿素所组成的缓冲液。 6.含有穿膜肽的寡肽-1(EGF)的融合蛋白，其特征在于其既可用于药品，医疗耗材，也 可以用于化妆品和保健食品的活性成分或添加剂。 7.为了市场应用的便捷与识别，在市场应用中将含穿膜肽的寡肽-1(EGF)简称为：寡 肽-1或PHPV蛋白。 2 2 CN 107459580 A 说　明　书 1/4页 一种利用酵母菌表达含有穿膜肽的寡肽-1（EGF）创新制备 工艺 发明领域 [0001] 本发明涉及一种工业化生产含有穿膜肽的寡肽-1(EGF)的制备方法，属生物工程 领域。 [000