morris水迷宫准则-生物探索.docVIP

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morris水迷宫准则-生物探索

Morris水迷宫实验准则 目 录 一、实验原理 1 二、Morris水迷宫的组成 2 三、硬件准则要求 2 四、实验流程准则 4 五、统计方法学准则 6 六、评价指标的准则 7 七、实验适用范围准则 9 八、Morris水迷宫实验优点 10 一、实验原理 20世纪80年代初,英国的心理学家Morris和他的同事利用大鼠在盛有水和牛奶混合物的不透明水池中搜索目标物的方法,研究大鼠的海马等脑区受到损害后的学习、记忆和空间定向以及认知能力时取得了令人瞩目的结果。这种装置不但构思新颖、实验设计合理以及方法简便和实用,而且便于观察和记录动物入水后搜索藏在水下平台所需的时间、采用的策略和它们的游泳轨迹,从而可分析和推断动物的学习、记忆和空间认知等方面的能力。虽然起初的实验对象为大鼠,但此后该迷宫系统成为评估啮齿类动物空间学习和记忆能力的经典程序,广泛运用于神经生物学、药学等领域的基础和应用研究中。对于水池的大小,Morris最初(1981年)用于大鼠的水池是直径1.32米、高为0.6米,但后来(1984年)改为直径2.14米、高0.4米。对于小鼠的实验水池,文献中介绍的迷宫直径差异巨大,小到0.6米, 大到2.0米。一般而言,过小的水池使小鼠爬上平台的偶然性增加,任务难度减小。± 1℃,小鼠可能低些在18~22℃。有文献报道,对小鼠进行了水温对迷宫成绩影响的观察,结果发现27~28组的小鼠成绩最差,而17~18组和21~22组小鼠的学习成绩没有区别,所以,我们推荐水迷宫实验用21~22水。水温对潜伏期影响很大,特别是大鼠,如果温度过高,大鼠在游几次后渐渐适应了迷宫环境,它就会把迷宫当“浴盆”了,如果水温过低,大鼠游泳能力不能坚持很久,会出现游几次潜伏期突然增大的现象。水温一般25度左右,气温导致水温偏差过大,应人为的调节水温。还水装一圈帘子,这样将光的影子挡住,又保持一定的透光度。池壁上悬挂两个物体作为近距离视觉,并多种远距离视觉。,不过现在都改用60了,有人做过实验,60s还可以减小各组的标准差Morris 水迷宫实验结果有多大的影响, 如何避免因此带来的系统误差等问题尚有待进一步研究。国外文献报道,如果水池的直径在2m,可以设置单次训练时间为120s,直径在1m至1.5m,选择训练时间为60s, 鉴于此,我们认为训练时间60s较为合适。时间过长,对鼠体力消耗也会过大。 实验次数:在隐藏站台试验中,每天训练4次,每个象限每天只被使用一次,一定不要将大鼠连续地放入同一个象限,因为大鼠可能会凭借位置或其他非记忆信息(如向右转弯)来定位站台。而且,接下来每天的象限顺序应当改变。在空间探索试验中,将大鼠置于水池中追踪120s,这个过程需要重复一次,因为在有些情况下,首次实验会观察到一些非正常变量,可能一些老鼠在改变了实验条件后迷失了方向。连续进行的两次实验计算平均值可以减少偏差,可以提供一个较高的精度和对先前学习记忆的较好控制。但是如果实验次数多于两次,将会导致在目的象限活动时间减少,得到不准确的空间探索结果。 实验动物:并非所有鼠株都适合于Morris迷宫测试,如BALB/c小鼠不能学会该任务(成绩并不随天数的增加而进步),129/SvJ的学习成绩也偏差如129/SvJ株的小鼠由于有年龄相关性视路病变,在衰老时完成以视觉为基础的学习记忆任务时就会出现困难。在C57BL/6,由于严重的秃头症存在,可能使某些小鼠产生抑郁,加上溃疡性皮炎,最终可能影响小鼠的游泳能力而影响实验成绩将动物浸入水中可能引起内分泌或其它应激效应后者与脑损害或药理学操作间的相互作用具有不确定性由于体力消耗太大,体温也丧失过多,年老体弱鼠完成任务较困难个体间的成绩差异巨大正常大鼠放入水中后左右观望打圈确定方向后直接游到台上,说明他记忆力好,这个现象是很重要的,有的大鼠游泳速度慢些,所以潜伏期比痴呆组大可以先用别的方法把大鼠初筛一下,然后再来跑水迷宫F值,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计;对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换,待满足正态或方差齐要求后,用转换后的数据进行统计;若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的,改用秩和检验进行统计。计数资料,比如说穿越站台的次数,可用X2检验,四格表总例数小于40,或总例数等于或大于40但出现理论数等于或小于1时,应改用确切概率法。 Morris 水迷宫的实验数据较为复杂,其统计分析难度也较大,尤其是对大鼠在所测得的逃避潜伏期如何进行统计学分析既往存在的问题较多。在过去的研究中,有的直接计算每天的平均逃避潜伏期后再进行t检验或方差分析,或根据大鼠的逃避潜伏期在定位航行试验后3d趋于稳定的情况,仅对后3d的平均逃避潜伏期进行t检验或方差分析。有的研究则就1~5d的逃避潜伏期进行单因素方差分析。我们认为以上统计方法

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