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7第7章_酶的多底物动力学
第七章、 酶的多底物动力学 第一节、术语 Cleland命名法: 底物:按与酶结合的次序 用A、B、C…表示 产物:按脱离酶的次序 用P、Q、R…表示 抑制剂用I表示 修饰剂用X、Y表示 酶存在形式有两种: 稳定状态中间物: E、F、G 表示 过渡状态复合物: 非中心复合物、中心复合物: 稳定状态中间物:(包括自由状态的酶): 可以与底物起双分子反应、不能进行单分子分解反应 过渡态复合物:可以单分子反应形成产物或底物、或转化成可单分子反应的中间物 非中心过渡态复合物:酶活性中心未被底物完全占据,EA、EAB、EPQ…… 中心过渡态复合物:酶活性中心被底物完全占据 仅可起单分子分解反应,而不能起双分子反应, (EAB) (EPQ) 反应物和产物的数目 用单、双、三、四等表示, 记: Uni-、Bi-、Ter-、Quad-、反应顺序从底物到产物 如:Uni-Bi反应:表示一种反应物生成两种产物的反应. Bi-Uni反应:表示二种反应物生成一种产物的反应. 多底物反应机理重要有两类: 序列机理:Sequential Mechanism 乒乓机理:Ping Pong Mechanism 序列机理:有序机理:Ordered Mechanism 随机机理: Random Mechanism 乒乓机理:Ping Pong Mechanism 表示法: 有序双双: Ordered Bi Bi 随机双双: Random Bi Bi 乒乓双双: Ping Pong Bi Bi 动力常数表示:KmA、KmB、KmP、KmQ分别表示底物A、B;产物P、Q的米氏常数; KiA、KiB、KiP、KiQ分别表示A、B、P、Q的抑制常数 反应机理的图形表示法: 用一条水平线表示酶分子历经的路线,酶存在形式写在水平线下面,底物、产物写在水平线上面,并用箭头表示结合或脱离酶。 例如:Ping Pong Bi Bi Ordered Bi Bi Random Bi Bi 第二节、Ordered Bi Bi 机理 一、Cleland表示法: 例如:乙醇脱氢酶 二、动力学方程的推导: 酶形式: 矢量图: 动力学项: E EA ( EAB =EPQ) EQ 反应速度: 根据Wang-Hanes 法则: 比速度: ………..…...(1) 动力学方程: ……………(2) …………….……(3) 三、反应速度方程用动力学常数表示法: . 注意几个原则: 原则1:最大反应速度: ….(4) 原则2:米氏常数: ……………..(5) 原则3:抑制常数: ……….(6) Haldane 方程式: ………(7) 四、如何测定动力学参数: . 产物不存在:[P]=[Q]=0 动力学方程可以简化为: 固定[B]浓度,改变[A]浓度, ………….(9) 双倒数作图: ………..(10) 斜率 = 纵轴截距 = 横轴截距 = 交点: 从交点横坐标可得KIA, 纵轴截距对1/[B]作图,可得KmB , 斜率对1/[B]作图可得KmA , 固定[A]的浓度,变化[B]的浓度,可得: ……………………………………….………(11) 1/v对1/[B]作图也为直线关系 斜率 =
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