专题19 基因工程.doc

专题19 基因工程 高频考点 基因工程的诞生 知道各阶段的发现对基因工程的意义 基因工程的原理及技术 基因工程的原理和其中涉及的各种技术手段是选修三的高频考点 基因工程的应用 熟知基因工程在农业、畜牧业和生物制药方面的各种应用 蛋白质工程 熟知蛋白质工程的原理及其与基因工程的区别和联系 【高考突破1】基因工程的基本工具及比较 有关酶的比较 种类项目 限制(性核酸内切)酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 解旋酶 作用底物 DNA分子 DNA分子片段 脱氧核苷酸 DNA分子 作用部位 磷酸二酯键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 碱基对间的氢键 作用特点 切割目的基因及载体，能专一性识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上 将DNA两条链之间的氢键打开 作用结果 形成黏性末端或平末端 形成重组DNA分子 形成新的DNA分子 形成单链DNA分子 载体 作用 ①作为运载工具，将目的基因转移到受体细胞内②利用它在受体细胞内实现目的基因的大量复制 具备的条件 ①能在受体细胞内稳定保存并大量复制②有多个限制酶切割位点，以便与外源基因连接③具有特殊的标记基因，以便进行筛选 种类 ①质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并能够自我复制的小的双链环状DNA分子②λ噬菌体的衍生物③动植物病毒 【名师点睛】 1.限制酶的应用特点 (1)在获取目的基因和切割载体时最好用同一种限制酶，以获得相同的黏性末端。 (2)为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接，可用不同的限制酶处理目的基因和载体。 2.载体的两点说明 (1)一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的载体进行人工改造。 (2)限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。 【高考突破2】基因工程的基本操作程序 1.目的基因的获取方法 (1)从基因文库中获取； (2)利用PCR技术扩增目的基因； (3)人工合成，常用的方法是反转录法和化学合成法。 2.基因表达载体的构建 (1)目的：使目的基因在受体细胞中稳 定存在，并可以遗传给下一代，并使目 的基因能够表达和发挥作用。 将目的基因导入受体细胞的方法 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 感受态细胞法(或Ca2+处理法) 受体细胞 体细胞或受精卵 受精卵 原核细胞 转化过程 目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→进入农杆菌→导入植物细胞→稳定维持和表达 目的基因表达载体提纯→取受精卵→显微注射→受精卵移植→ 新性状动物 首先用Ca2+处理大肠杆菌细胞，使细胞壁的通透性增大，细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的感受态。第二步是将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程 目的基因的检测和鉴定 【名师点睛】 1.基因工程操作过程中发生碱基互补配对的步骤 (1)获取目的基因和同种限制酶处理载体：得到的黏性末端碱基互补； (2)构建基因表达载体：目的基因的黏性末端与载体的黏性末端互补； (3)表达检测DNA-DNA、DNA-RNA杂交时，遵循碱基互补配对原则。 2.原核细胞、真核细胞基因结构的异同 (1)相同点：都有编码区、非编码区，在非编码区都有调控遗传信息表达的核苷酸序列，在编码区上游均有与RNA聚合酶结合的位点。 (2)不同点：原核细胞的基因结构简单，编码区连续；真核细胞的基因结构复杂，编码区间隔，不连续。 3.操作的注意问题 (1)获取目的基因时要保证其完整性。 (2)质粒的切割要保证标记基因的完整性。 【高考突破3】基因工程的应用 转基因生物 目的基因 成果举例 植物基因工程 抗虫转基因植物 抗虫基因：Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因 抗虫水稻、抗虫棉、抗虫玉米 抗病转基因植物 抗病毒基因：病毒外壳蛋白基因、病毒的复制酶基因；抗真菌基因：几丁质酶基因、抗毒素合成基因 抗病毒烟草、抗病毒小麦、抗病毒番茄、抗病毒甜椒 植物基因工程 抗逆转基因植物 抗逆基因：渗透压调节基因、抗冻蛋白基因、抗除草剂基因 抗盐碱和抗干旱的烟草、抗寒番茄、抗除草剂的大豆和玉米 改良品质的转基因植物 优良性状基因：提高必需氨基酸含量的蛋白质编码基因、