第9章 色谱分析法概论.pptVIP

9.1 色谱法分类 9.2 色谱常用术语 9.3 色谱分离的基本理论 组分的色谱保留特性是由组分在色谱系统中的热力学性质所决定的。对于分配色谱而言，该热力学性质即为分配系数和容量因子。 【例9-1】 一个气相色谱柱，已知固定相的保留体积Vs=14.1mL，载气流速为43.75mL/min。分离一个含有ABC三组分的样品，测得组分的保留时间分别为A=1.41min，B=2.67min，C=4.18min，空气为0.24min。试计算：（1）死体积（假定检测器及柱接头等体积忽略不计）；（2）各组分的调整保留时间和分配系数；（3）相邻两组分的相对保留值r。 1)涡流扩散(eddy diffusion)项 －A 2)分子扩散 (longitudinal diffusion) 项—B/u 3)传质阻力(mass transfer)项— Cu 4)载气流速与柱效-最佳流速 9.3.3分离度 2.影响分离度的因素 首先相对保留值r对于相邻组分的分离度有重要的影响。例如，当r由1.10下降到1.05或1.02时，要保证R=1.5的分离效果，n需要相应增加3.64倍与21.5倍。由于两组分的r值与固定相、流动相的性质直接相关，说明根据难分离物质对的化学性质，合理选择固定相和流动相，增大r值，对于提高难分离物质对的分离度可起到事半功倍的作用。 9.4色谱定性和定量的方法 2)利用保留指数定性 保留指数计算方法 9.4.1 色谱定性方法 1.保留值对比定性 1）已知物对照法 同一种物质在同一根色谱柱上，在相同的操作条件下保留值相同。适用于有对照品的已知组分的鉴定。先将试样注入色谱柱，记录色谱图。再将适量的已知对照物质加入试样中，按相同方法测定。对比加入对照物前后的色谱图，若加入后某色谱峰相对增高，则该色谱组分与对照物质可能为同一物质。 又称Kovats指数（Ⅰ），是一种重现性较好的定性参数。 测定方法： 将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保留指数为600）。 其它物质的保留指数（IX）是通过选定两个相邻的正构烷烃，其分别具有Z和Z＋1个碳原子。被测物质X的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图所示： 【例9-7】 乙酸正定酯在阿匹松L柱上，柱温100℃时，以记录纸长度代表调整保留时间。正庚烷的调整保留时间为174.0s，正辛烷的调整保留时间为373.4s，乙酸丁酯的调整保留时间为310.0s，求乙酸丁酯的保留指数I。 解 ：依题意可知，XZ=174.0mm，XZ+1=373.4mm，Xi=310.0mm 2.利用化学反应定性把由色谱柱流出的待鉴定组分通入官能团分类试剂中，观察是否发生反应（显色或产生沉淀），可判断该组分的官能团或类别。例如，要鉴定组分是否为醛、酮，可将该色谱馏分通入2,4-二硝基苯肼试剂中，如产生橙色沉淀，则说明组分为1~8碳原子的醛或酮。 3.与其他仪器联用定性 目前常用“在线”(on-line)联用方式，用毛细管色谱柱与傅里叶红外仪联用(GC-FTIR)或与质谱联用(GC-MS)。这些联用仪器和技术已完全成熟，成为现代仪器分析的重要工具。其中毛细管气相色谱与质谱联用已成为药物分析的重要手段，如挥发油的成分分析、部分治疗药物的鉴别和定量、违禁药物的检测、药物代谢动力学的研究等。 Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer (MS) Separation Identification B A C D 9.4.2 定量分析法 被测组分的色谱峰面积或峰高与待测组分的浓度成正比是色谱法定量的依据。现今的色谱仪色谱数据处理系统在记录色谱图的同时，可存储、打印出各种参数和数据处理的结果，如峰高、峰面积、保留时间等。 1.定量校正因子 相同量的不同组分在同一检测器中的响应值并不同，即相同量的不同组分产生不同值的峰高或峰面积，而且同一组分在不同的检测器上也会有不同的响应值。为使色谱峰的峰面积或峰高与组分含量间建立起确定的数量关系，就需要知道二者之间的比例系数，该比例系数就是定量校正因子f `。在相同色谱条件下，某一组分产生的色谱响应值（峰面积A或峰高h），与这一组分的质量m成正比： f `为该组分在检测器上的响应斜率，是一个比例常数，称为该组分的绝对校正因子。其物理含义是单位峰面积或单位峰高所代表的组分的量（质量、物质的量或体积）。 由于各化合物的绝对校正因子不易测定，它随实验条