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人体解剖与组织胚胎学专业毕业论文 [精品论文] bFGF转染羊膜上皮细胞的建立及其对视神经再生作用的初步研究 关键词：视神经再生 羊膜上皮细胞 碱性成纤维细胞生长因子 基因转染 慢病毒 视神经损伤 摘要：目的：视神经损伤后虽然有神经再生的潜力，但由于整个微环境不支持神经再生，所以目前为止因视神经损伤或疾病导致的失明还没有较好的治疗方法，而基因修饰细胞载体的研究可为视神经再生提供新思路。因此，本研究从细胞移植的角度，建立用于基因修饰干细胞移植治疗视神经损伤的人bFGF基因修饰大鼠羊膜上皮细胞，并移植入大鼠视神经损伤模型中，初步观察和探讨该细胞对视神经修复的作用及相关机制。 方法：(1)取妊娠晚期SD大鼠的羊膜组织，贯序消化后进行羊膜上皮细胞原代培养，传代细胞进行免疫荧光细胞化学和RT-PCR鉴定。(2)构建含人NGF分泌肽-bFGF编码基因的慢病毒载体，经测序鉴定后进行慢病毒包装，收获病毒上清。(3)用病毒上清对传代大鼠羊膜上皮细胞进行感染并筛选，经免疫荧光细胞化学、RT-PCR及ELISA法检测基因转染效果，体外培养观察细胞生长活性。(4)用bFGF基因转染羊膜上皮细胞的培养上清对PC12细胞进行培养，以检测所分泌bFGF多肽的生物学活性。(5)将基因转染羊膜上皮细胞及未转染羊膜上皮细胞移植入成年雄性SD大鼠视神经吸断伤模型中，设以下4组：正常对照组；损伤组，于眼球后1.