人体解剖与组织胚胎学专业毕业论文 [精品论文] 两种精子优选法对精子DNA结构完整性及其它因素的影响.docVIP

人体解剖与组织胚胎学专业毕业论文 [精品论文] 两种精子优选法对精子DNA结构完整性及其它因素的影响 关键词：精子优选法 Sperm密度梯度离心法 改良巴氏染色 精子染色质 结构完整性 人类辅助生殖 摘要：目的：上游法和Pure Sperm（硅烷化硅胶悬浮液）密度梯度离心法是广泛使用于人类辅助生殖技术中的两大精子优选技术，两种技术均可优选出高质量的精子，但对精子DNA结构完整性优选的确切效果报道较少，本实验拟采用精子染色质结构分析法，对未处理精子、以及经上游法和Pure Sperm法处理后的精子进行DNA完整性检测，并对精子其它参数进行检测，以综合评价两种优选方法对正常密度精子及低密度精子的优选效果，为不同精液选用优选方法提供相应实验依据。 方法：随机抽取2007年10月～2008年6月重庆市妇产科医院遗传与生殖研究所不育症男性精液标本60份，30份为正常密度精子精液（A组），其中30份为低密度精子精液B组。①上游法：将液化精液、精子培养液按1：2的比例混合、离心2次，后以斜放37℃温箱中静置30至60min，吸取上层云雾状液体备用。②Pure Sperm法：在一试管内依次加入80％ Pure Sperm、40％ Pure Sperm、液化精液之后离心弃上清，加入培养液混匀、离心两次后吸取、重悬底部精子备用。③按WHO推荐的标准方法对优选前后两组精液作精子密度计数，以及活