HPLC的验证.doc

HPLC的验证 目 录 1. 验证目的Validation purpose 2 2. 验证范围Validation Scope 2 3. 验证周期Validation Cycle 2 4. 规程Regulations 2 4.1. 确认验证所需文件Qualification required documents 2 4.2. 所用试剂与玻璃仪器的准备Reagent and glass instruments preparation 3 4.3. 流量控制阀检测Flux control valve test 3 4.4. 流量比例控制阀检测Proportion test 3 4.5. 基线噪声和基线漂移的检定 Baseline Noise Baseline Drift 4 4.6. 最小检测浓度 Minimal Detectable Concentration 4 4.7. 检测器性能检查Inspect apparatus test 5 4.8. 定性、定量重复性Qualitative and Quantitative analysis 5 4.9. 偏差Deviation 6  验证目的Validation purpose 本验证的计划任务是：确认仪器达到设计要求。验证仪器的性能是否符合性能要求。 验证范围Validation Scope 本验证主要是对试验室的高效液相色谱仪进行性能确认。 验证高效液相色谱仪的流量控制器的性能、二元泵流量比例性能、进样体积控制阀与检测器的性能检查。 相关验证： 本确认方案应确保所使用的电子天平经过校验，所使用的容量仪器经过检定。 验证周期Validation Cycle 每年三个月对高效液相色谱仪的泵进行流量性能、二元泵流量比例性能的检查，并进行进样体积控制阀与检测器的性能检查。 规程Regulations 确认验证所需文件Qualification required documents 目的 核实在本次确认中所需的SOP、参考资料等文件均是可用的 程序 查找和本次确认相关的文件，确保公司文件均为经批准的现行版本，记录文件名称、文件编码、修订版次等内容。如为外来文件，应将引用的段落号在下表备注中进行描述。 可接受标准 所有必需的文件必须是可用的和经过批准的。 测试报告 填写“工作表”。 在偏差报告中记录在测试过程中所发生的偏差。 所用试剂与玻璃仪器的准备Reagent and glass instruments preparation 目的 按相关SOP规定准备所需试剂与玻璃仪器。 程序 由专人按相关SOP规定程序准备试验用色谱纯甲醇，色谱纯甲醇试剂为合格供应商生产并在效期内使用。之后经过0.45μm的微孔滤膜过滤。 所用玻璃容器容量瓶必须是经过计量局检定的仪器。 可接受标准 甲醇，级别：色谱纯。 玻璃仪器经过计量局检定。 流量控制阀检测Flux control valve test 目的 检查仪器流量控制阀对流量的控制精度。 程序 先将准备好的25ml容量瓶在电子天平上称重（W1）（保留到万分之一毫克）。以纯甲醇为流动相，将流速分别设定为0.5ml/min，1.0ml/min，1.5ml/min。用秒表计时5分钟，将流出的流动相用25ml容量瓶接收。计时结束后将容量瓶进行精密称重（W2）。（W2—W1）为接收到的甲醇的重量，（W2—W1）/ρ=甲醇的体积，体积/时间=流量。 可接受标准 每个流速下测定三次。流量偏差允许值，流速设定为0.5ml/min允许值为5%，流速设定为1.0ml/min允许值为3%，流速设定为1.5ml/min允许值为2%。 测试报告 填写“工作表”。 在偏差报告中记录在测试过程中所发生的偏差。 流量比例控制阀检测Proportion test 目的 对于多泵仪器，检查仪器流量比例控制阀对流量的控制精度。 程序 由多元泵设置阶梯式洗脱程序，A溶剂为纯水，B溶剂为含0.1%丙醇的水溶液，B经由5个阶梯从0变到100%。将泵与检测器连接，以A溶剂冲洗系统，基线平稳后开始执行梯度程序，记录梯度变化曲线，记录A、B不同比例时的信号值，重复测量2次，计算平均值。由B溶剂的含量及对应得信号值计算梯度误差，取最大者作为仪器梯度误差。 可接受标准 按照下述公式计算，梯度误差允许值为±3%。 Gci=(Li-Lm)/Lm×100% Gci—第i段梯度误差（%）； Li—第i段输出信号值平均值； Lm—各段输出信号平均值的平均值。 测试报告 填写“工作表3”。 在偏差报告中记录在测试过程中所发生的偏差。 基线噪声和基线漂移的检定 Baseline Noise Baseline Drift 目的 检查仪器检测器灵敏度及控制稳定性。 程序 以100%甲醇为流动相，选