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11-1 微生物的生长
生长是原生质总量增加的过程 个体生长 个体繁殖 群体生长 群体生长 个体生长 + 个体繁殖 微生物学中指的生长均为群体生长 第一节 微生物生长的测定 一、 生长量 (适用于细菌、放线菌、酵母菌、霉菌) 1、直接法: (1)测体积法 (2)称干重法:离心法和过滤法 干重一般为湿重的10 % -20% 2、间接法 (1)生理指标法 细胞含氮量(细菌12.5%,酵母7.5%, 霉菌6.0%) 细胞含碳量 细胞其他指标,如DNA测定等 二、计数法 ?1、?直接法: ——计数板法(如:血球计数板法) 特点:总菌数(死活细胞都有) 2、间接法: 分批培养(batch culture) 将微生物置于一定容积的定量的培养基中培养,培养基一次性加入。不再补充和更换,最后一次性收获。 研究中常用的三个参数 繁殖代数(n) 指数生长方式: 1 2 4 8… …2n 设接种时细胞数为x1, 时间为t1, 到时间t2后,繁殖n代, 细胞数为x2,它们之间的相互关系为: x2 = x1×2n 以对数表示:㏒ x2 = ㏒ x1 + n㏒2 ㏒ x2 - ㏒ x1 ∴ n = ㏒2 = 3.322(㏒ x2 - ㏒ x1 ) 生长速率常数 ( growth curve, R) n 3.322( ㏒ x2 - ㏒ x1 ) R = = t2 – t1 t2 – t1 代时 ( generation time, G) 1 t2 – t1 G = = R 3.322(㏒ x2 - ㏒ x1) 特点:菌体生长速率恒定,菌体均一、 密度稳定,但产量低于最高菌体 产量 使用范围:科学研究 小结 第一节 微生物生长的测定 一、生长量测定 1、直接法: (1)测体积法 (2)称干重法 2、间接法: (1)生理指标法:细胞含氮量细胞含 碳量;细胞其他指标 (2) 比浊法 二、计数法? 1、直接法 —— 计数板法 2、间接法:—— 稀释平板菌落计数法 第二节 微生物的群体生长规律 一、 典型的生长曲线 二、 微生物的连续培养 三、 微生物的同步生长 4、衰亡期(decline phase) (1)特点: 死亡细胞数大于新生数 群体中活菌数目急剧下降 细胞出现多形态、畸形、芽孢形成,R<0 衰亡期比其它各期时间更长,而且时间长度 取决于菌种及环境条件 连续培养(continuous culture) : 在微生物培养的过程中,不断地供给新鲜的营养物质,同时排出含菌体及代谢产物的发酵液,让培养的微生物长时间地处于对数生长期,以利于微生物的增殖速度和代谢活性处于某种稳定状态。 二、 微生物的连续培养 1、恒浊连续培养法 概念:通过调节培养基流速,使培养液 浊度保持恒定的连续培养方法 方法:当浊度高时,使新鲜培养基的流 速加快,浊度降低,则减慢培养 基的流速 特点:营养基质过量,微生物始终以最高速率进行生长,并可在允许范围内控制不同的菌体密度;但工艺复杂,烦琐 使用范围:用于生产大量菌体、生产某些代谢产物,如乳酸、乙醇等 概念:以恒定流速使营养物质浓度恒定而保 持细菌生长速率恒定的方法 原理:通过控制某一种营养物浓度(如碳、 氮源、生长因子等),使其始终成为 生长限制因子,而达到控制培养液流 速保持不变,并使微生物始终在低于 其最高生长速率条件下进行生长繁殖 2、恒化连续培养法 3、连续培养优缺点 (1)优点 ① 高效:简化了操作 ② 自控:便于各种仪表进行自动控制 ③ 产品质量稳定 ④ 节约大量动力、人力、水和蒸汽 (2)缺点 ① 菌种易
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