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4.宫颈粘液穿透试验: 1)?? 体内试验:性交后试验(PCT) 注意事项:①排卵期进行 ②禁欲至少2天 ③最好在性交后9~24小时进行观察。 诊断标准:正常为宫颈粘液中的活动精子数50个/HP或 A级精子20个/HP 影响因素:①女方的内分泌状况。 ②宫颈粘液中的白细胞。 ③阴道pH,7或8.5可导致PCT异常。 ④宫颈结构异常。 ⑤抗精子抗体影响。 ⑥性功能异常,如阴道痉挛。 ⑦精子质量差。 2)?? 体外试验: ①??? 玻片试验 ②??? 精子-宫颈粘液接触试验 ③??? 毛细管试验: 穿透介质: 人宫颈粘液; 宫颈粘液代用品: 牛宫颈粘液; 含人血清精子营养液; 含牛血清白蛋白精子营养液; 鲜鸡蛋清; 5.精子顶体酶测定(明胶膜法): 1)?制备5%明胶溶液,吸取100ul均匀涂于载玻片上,自然干燥,4℃湿盒备用,使用前用甲醛-酒精固定液固定60分钟。 2)?精子处理:取液化精液,用PBS稀释至2~4×106个/ml。 3)??涂片:取1滴精液涂于明胶膜上,37℃湿盒2小时。 4)?观察:于相差显微镜下计数有反应精子的百分率及精子的平均反应直径。 5)?正常值:平均反应率≥65%,平均反应直径≥25μm。 6.去透明带仓鼠卵穿透试验 1)?精子准备: ①?精液充分液化 ②?调整精子浓度至10×106个/ml ③?精子获能:取精液0.5ml,5%CO2,95%空气中, 37℃孵育18~24小时,调整精子浓度至4×106/ml。 男性不育的实验室诊断及评估 南京医科大学生殖医学重点实验室 周作民 维持男性生育的基本条件: (1)睾丸内产生足够数量的精子。 (2)精子在男性生殖管道内获得运动能力和 受精能力,既精子的成熟。 (3)输精管道通畅。 (4)具有正常的性功能。 (5)附属性腺功能正常。 不育症诊断的步骤: 1.?病史采集: 包括年龄、职业、生育史、疾 病史、家族史等。 2.??体格检查:包括外生殖器和全身体检。 3.??实验室诊断 4.??特殊检查 一、 精液常规分析 ┌精子(5%) 精液组成┤ ┌精囊腺液(60%)-凝固因子、果糖 └精浆(95%)├前列腺液(20%)-液化因子 ├尿道球腺液(3%) └睾丸液、附睾液 ——精子 精液分段成分: 前段-睾丸液,附睾液(精子),尿 道球腺液 中段-前列腺液 后段-精囊腺液 精液变量的参考值: 精液量:2~6ml 颜色:灰白 液化时间:60分 粘稠度:拉丝2cm pH: 7.2~8.0 活率:60% 活力: A+B50%或A25% 精子计数:2000万/ml 畸形率:30% 脓细胞: 5个/HP (1×106/ml) 精子活力分级 A 级:快速前向运动 B 级:慢或呆滞的前向运动 C 级:非前向运动 D 级:不动 影响精液常规数据准确性的因素: ①?自身的波动性: 要求首次检查应连续进行两次,间隔时间7 天—3周,两次结果差异大时应再检一次。 2.?????? 精液液化及粘稠度异常 ①???精液不凝固或凝固不全:精液稀薄,流动性大。 病因:精囊腺炎症 ②???精液不液化或液化不全:液化时间30分 病因:前列腺功能障碍 3.?精液pH异常: 测量方法:pH试纸(pH范围6.1-10.0 或6.4-8.0) ①?pH过低:pH7.2 原因:①输精管和精囊腺的缺如 ②附睾病变 ② pH过高: 原因:①精囊腺液分泌过多 ②前列腺液分泌过少 4.?精子记数异常: 正常≥20×106个/ml
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