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结核病实验室诊断技术; Robert Koch Mycobacterium tuberculosis;分枝杆菌生物学特性;结核分枝杆菌的抵抗力;实验室生物安全;属; 根据分枝杆菌分类国际研究班(IWGMT)的分类方案将本属细菌分为三类,即
缓慢生长菌:结核分枝杆菌;RunyonⅠ(光产色菌) 、Ⅱ(暗产色菌) 、Ⅲ群(不产色菌) ;
快速生长菌: Runyon Ⅳ群;
特殊营养要求:麻风杆菌;;Evolution of the Mycobacterium tuberculosis complex;涂片染色显微镜检查;三、病原检测、鉴定技术-2;常规培养生化鉴定
耐热触酶试验
堪萨斯分枝杆菌(+),结核分枝杆菌(-)
硝酸盐还原试验
结核分枝杆菌(+),牛分枝杆菌(-)
吐温-80水解试验
堪萨斯分枝杆菌(+),瘰疬分枝杆菌(-)
尿素酶试验试剂
结核分枝杆菌(+),蟾蜍分枝杆菌(-)
芳香硫磺酯酶试验
偶然分枝杆菌(+),结核分枝杆菌(-)
铁离子吸收试验
偶然分枝杆菌(+),龟分枝杆菌(-)
亚碲酸盐还原试验
胞内分枝杆菌(+),次要分枝杆菌(-)
烟酸试验
结核分枝杆菌(+),牛分枝杆菌(-);PNB、TCH鉴别培养基鉴定;分枝生物学鉴定技术
多位点PCR;分枝生物学鉴定技术PCR-RLFP
;分枝生物学鉴定技术
IS6110-RLFP ;;分枝生物学鉴定技术 Spoligotyping ;;MLVA15 clustering of a selection of MTB isolates from 12 provinces in China;分枝生物学鉴定技术 MLVA;分枝生物学鉴定技术
恒温PCR技术
荧光定量PCR技术
芯片技术
技术关键:
标本前处理
特异的DNA分子标识物
;常用病原检测、鉴定程序;细胞免疫学检测技术
体液免疫学检测技术
技术关键:
特异抗原
;PPD皮试、ESAT-6
基于T细胞检测技术
IFN-γ
ELISPOT
ESAT6 and CFP10
;检测体液中抗体:IgM、IgG
间接酶联免疫技术、酶免疫斑点、 间接免疫荧光技术、胶体金
技术关键:特异抗原
;基于细菌培养的技术:
比例法、绝对浓度法
金标准,费时、费力、效果不好
The BACTEC radiometric method
速度稍快、费用昂贵
;基因检测技术
PCR—DNA测序分析
Solid-phase hybridization techniques:
LiPA strips showing different mutations ;采用基因测序(DNA sequencing)分析和反向斑点杂交技术(RDH)对分别对异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇四种一线抗结核药物的耐药相关基因进行了检测,共检测了1300余株临床菌株。;荧光定量PCR技术
基因芯片技术
噬菌体技术
;Thank You
for Your attention
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