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课件制作 陆曙梅 分枝杆菌属 分枝杆菌属主要特点 是一类直或微弯曲、有分枝生长趋势的杆菌。 细胞壁脂质含量高,主要为分枝菌酸。 具有抗酸性,革兰染色不易着色,常用抗酸染色。 专性需氧营养要求特殊,大多数生长缓慢。 不产内、外毒素和侵袭性酶等致病物质,所致疾病呈慢性。 分枝杆菌属种类 结核分枝杆菌复合群 结核分枝杆菌 牛分枝杆菌、 非洲分枝杆菌 田鼠分枝杆菌 非典型分枝杆菌 麻风分枝杆菌 光产色分枝杆菌 暗产色分枝杆菌 不产色分枝杆菌 迅速生长分枝杆菌 分枝杆菌属 结核分枝杆菌--形态染色 细长略弯,分枝生长趋势 无芽孢,无鞭毛,部分菌株有荚膜 革兰染色阳性,不易着色 抗酸染色阳性 结核分枝杆菌--培养特性 生长条件: 专性需氧、细胞内寄生菌、最适pH6.5~6.8、营养要求高、培养基含鸡蛋、马铃薯粉、甘油、孔雀绿等 生长现象: ※生长缓慢 ※改良罗氏培养基菌落特征:干燥、淡黄色、 质地较硬的R型菌落 ※液体培养基:形成菌膜,有毒株呈索状生长 结核分枝杆菌--生化反应 生化反应不活泼,不发酵糖类 与非结核分枝杆菌鉴别: 耐热触酶试验-;(非结核分枝杆菌+) 与牛分枝杆菌鉴别 烟酸试验+;(牛分枝杆菌-) 结核分枝杆菌--抵抗力与变异性 抵抗力特点:“三耐四敏” ※耐干燥、耐酸碱、耐孔雀绿(1:13000) ※对湿热、70%乙醇、紫外线、常用抗结核药物(但长期使用易产生耐药性) 变异性 ※典型形态-→多形性 ※ R型菌落-→S型菌落 ※有毒-→无毒(用于制备疫苗) ※抗结核药敏感-→耐药 结核分枝杆菌--致病物质 脂质 索状因子:与该菌毒力有密切关系 磷脂: 分枝菌酸:与抗酸性有关 蜡质D:具有佐剂作用 硫酸脑苷脂 蛋白质 糖类 结核杆菌不产生内、外毒素,不产生侵袭性酶 结核分枝杆菌--涂片检查 直接涂片 薄涂片 厚涂片 集菌涂片 沉淀集菌法 漂浮集菌法 荧光显微镜检查法: 金刚胺O染色→荧光显微镜下检查 抗酸染色--报告方式 报告方式 镜检结果 - 仔细检查300个视野未发现抗酸杆菌 ± 300个视野内发现1~2条抗酸菌 + 100个视野内发现1~9条抗酸菌 2+ 10个视野内发现1~9条抗酸菌 3+ 每个视野内发现1~9条抗酸菌 4+ 每个视野内发现9条以上抗酸菌 结核分枝杆菌--分离培养 标本前处理: ※目的:杀死杂菌;液化标本 ※方法: 4%NaOH法; 4%H2SO2法; 胰酶-新洁尔灭法等 培养基选择:罗氏培养基、米氏培养基、小川培养基等 接种 培养 培养结果记录与报告方法 报告方式 培养结果 + 斜面20个菌落以上,占斜面1/4以下 2+ 斜面上菌落生长面积占1/4以上,1/2以下 3+ 斜面上菌落面积占斜面1/2以上,3/4以下 4+ 斜面上菌落生长密集,成菌苔 非典型分枝杆菌 是指结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。 大多为环境中的腐生菌 对酸碱比较敏感 对常用抗结核药耐受 为条件致病菌,艾滋病患者易感染鸟复合分枝杆菌 麻风分枝杆菌--生物学性状 为抗酸杆菌 细胞内寄生 有麻风杆菌寄生的细胞呈泡沫状,称为麻风细胞 体外人工培养尚未成功 犰狳是动物感染模型 * * 课件制作 陆曙梅
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