(精编)【医学精品课件之抗生素】高速逆流色谱分离纯化抗生素教学课件.pptVIP

HSCCC分离纯化天然环孢菌素 仪器：同田生物TBE-300 分离前 分离后:石油醚/丙酮/水（3：3：2）, Mobile Phase: LP 组份 纯度（%） 收率（%） 第一部分 Cyclosporin C 99.3 85.0 第二部分 Cyclosporin B 98.7 88.5 第三部分 Cyclosporin A 98.6 90.2 第四部分 Cyclosporin D 98.4 86.3 高速逆流色谱分离纯化抗生素 郑 卫 （福建省微生物研究所 福州 350007） 内 容 提 要 一 高速逆流色谱技术简介 二 溶剂选择 在逆流色谱中的重要性 三 高速逆流色谱技术分离纯化抗生素实例 一 高速逆流色谱技术简介 高速逆流色谱(High Speed Counter Current Chromatography, HSCCC) a 多层盘绕管；b 平衡物 优缺点（与HPLC等液-固色谱技术比较) 优点 分离原理不同：互补性强 无需固体作固定相 ：不存在固体对样品组分的吸附、玷污、变性、失活、拖尾等现象，能实现很高的回收率，节省昂贵的材料消耗和溶剂消耗（HPLC的1/10以下），运行使用的后续投入较低 溶剂极性可调：无需更换不同极性的色谱柱即可实现流动相从弱极性到强极性或相反的转化 色谱柱无填料，柱内空间全部是有效空间，容积大：样品负载能力强，制备量大，重现性好 盘管总体积100mL， 一次分离量：0.5-2克 盘管总体积3000mL，一次分离量：15-60克 表1 最佳溶剂体系选择表 极性较弱溶剂 最佳溶剂 极性较强溶剂 heptane, CHCl3 THF H2O heptane, toluene, MiBK, CHCl3, EtOAc ACO H2O heptane methyl ethyl ketone H2O THF DMSO H2O toluene, MtBE, MiBK, EtOAc MeCN H2O heptane, toluene, CHCl3, EtOAc BuOH H2O heptane, toluene, CHCl3, EtOAc PrOH H2O heptane, CHCl3, EtOAc EtOH H2O heptane, toluene, CHCl3, EtOAc, BuOH MeOH H2O heptane, toluene, CHCl3, MiBK, EtOAc, BuOH HOAc H2O CHCl3 HCOOH H2O 非水体系 Heptane THF, DMF, EtOAc, PrOH, EtOH