病毒性肝炎血学检测的基础与实践.ppt

HBsAg(－)HBeAg(+)阳性携带者新的S基因变异 PCR产物测序 克隆后测序 pre S2 gene HBsAg(－)HBeAg(+)阳性携带者前S2基因序列 PCR产物测序 克隆后测序 HBsAg(－)HBeAg(+)阳性HBV携带者 IF 3.124 具有研究价值的HBV标本 - - - - - - +/- 抗-HBc ？抗c阴性 + - - - ？抗c阴性* - - + - ？抗c阴性 + - + - ？抗c阴性 + - - + 转归 - + - + 转归 - - - + 变异 +/- +/- + + 研究内容 抗-HBe HBeAg 抗-HBs HBsAg *未接种疫苗，即自然感染除外。 丙型肝炎病毒 HCV HCV 30-60 nm 有包膜的RNA病毒，核心含有核心蛋白和RNA－－单链正义 HBV HCV抵抗力弱，且RNA容易降解，检测核酸时，标本需在30分钟内分离血清，-80 oC保存。 Lipid layer 脂质层 Core, 核心蛋白 E1, 包膜蛋白1 E2, 包膜蛋白2 RNA, 病毒核酸 直径 30-60 nm 结构蛋白 HCV结构简图 糖基化蛋白 HCV示意图 HCV基因与基因产物 hypervariable region 1, HVR1 Untranslated Region, UTR Noncoding region, NCR 针对HCV所有抗原的抗体都没有证实有中和作用 HVR1 38 clones 15 sequences HCV高度变异 HVR1 抗原检测 HCV core: 仅用于研究 抗-HCV IgM：一般不开展，阳性率低 HCV RNA：有条件的开展；抗病毒治疗考核疗效 抗-HCV IgG：开展，(+)通常表示有HCV感染 HCV病原学诊断 针对HCV所有抗原的抗体都没有证实有中和作用 抗-HCV IgM：一般不开展 抗-HCV IgG：开展，90-95％的(+)提示HCV感染 HCV病原学诊断－－抗-HCV检测 包被抗原 1st代 3rd代 2nd代 50-75% 90-95% 95-99% 阳性率 丁型肝炎病毒 HDV Deltavirus genus中的唯一病毒 HDV, 36 nm HDV RNA, 1.7 kb 缺陷病毒，必须有HBsAg HDAg：仅用于研究 抗-HD IgM：(＋)近期感染 抗-HD IgG：(＋)感染 HDV RNA：仅用于研究 HDV病原学检测 仅在HBsAg阳性人群中检测才有意义： 戊型肝炎病毒 HEV 属于family Hepeviridae, genus Hepevirus HEV, 30-32 nm 无包膜：抗原种类少 新的HEV发现：兔HEV－－王佑春等 HEV基因及其蛋白 ORF1 ORF3 ？ ORF2 5’ 3’ 核衣壳 Capsid 非结构蛋白 结构蛋白 主要抗原决定簇 中和免疫 459 607 核酸：单链正义RNA，7.2 kb 0 2 4 6 8 10 12 14 转氨酶升高期 症状期 IgM IgG 病毒血症 大便排病毒 抗戊肝抗体浓度 感染后周数 HEV感染后人体抗体应答－－与HAV类似 抗-HEV IgM：感染后～3周即可阳性，1-3月后转阴，近期或急性感染。 抗-HEV IgG：IgM产生后数天即可阳性，存在数十年，单纯阳性很可能是既往感染，故单独检测抗-HAV IgG通常不用于诊断。 HEV抗原：一般不开展，仅用于研究 HEV病原学检测－－与甲肝类似 抗-HEV IgM：(＋)近期感染 抗-HEV IgG：双份血清 HEV RNA：一般不开展，仅用于研究 HEV病原诊断－－抗-HEV 同时检测抗HAV IgM和IgG时：4种情况 仅检测抗-HEV IgM时 戊型肝炎 抗-HEV IgM 阳性 抗-HEV IgG 阳性 戊型肝炎 1. 2. 既往感染，对戊肝有免疫力 排除戊肝，而且为易感者 抗-HEV IgM 阴性 抗-HEV IgG 阳性 抗-HEV IgM 阴性 抗-HEV IgG 阴性 3. 阳性 阴性 排除 同时检测抗HAV IgM和IgG时：4种情况 戊型肝炎早期 或IgM假阳性 1-2周后复查 戊型肝炎 戊型肝炎 IgM 假阳性 排除戊型肝炎 抗-HEV IgM 阳性 抗-HEV IgG 阴性 IgM 阳性 IgG 阳性 IgM 阴性 IgG 阳性 IgM 阳性 IgG 阴性 4. HEV病原诊断－－抗-HEV 抗-HEV检测试剂质量差异很大(国外) 0 10 6 缅,墨 － 2,3 S EIA 12 0 2 2 缅,墨 － 3 S EIA 11 0 3 [6] 7 [1] 缅甸 － 2 S EIA 10 5 [2] 1 1 缅甸 － 3 S EIA 9 0 14 [1] 6 缅,墨 大