超高效液相色谱在复杂体系中药分离分析中的应用.pdfVIP

★v01．8No．3 2006第八卷第三期 摘要：超高效液相色谱比高效液相色谱分析速度更快更灵敏，它使用1．7斗m颗粒度的色谱柱 填料，能够获得更高的柱效，并且在更宽的线速度范围内柱效保持恒定，因而有利于提高流动相流 速、节省分析时间和增加峰容量，这种固定相还减少了表面残余硅羟基，适合于分析中药中生物碱类 等特殊样品。本论文对超高效液相色谱在复杂体系中药中的分离分析进行了简要介绍，尽管使用小 粒径的色谱柱填料，超高效液相色谱本质上应符合液相色谱的保留值规律、峰形规律，我们对此进行 了初步验证。研究表明了超高效液相色谱将在复杂体系中药的分离分析中发挥重要的作用。 关键词：超高效液相色谱复杂体系 中药 Waters公司在2004年推出了一种新的液相色谱样品的分析[5棚等等。中药是一个复杂的未知体系，不 仅化合物种类繁多、数目不明确。而且含量差异大、 技术一超高效液相色谱(UPLC)，它采用1．7斗m颗粒 度的色谱柱填料，能获得更高的柱效，并且在更宽的 已知化合物少，中药现代化又是目前研究的热点和 线速度范围内柱效保持恒定，因而有利于提高流动 难点，中药要走向世界，首先必须具备国际认可的标 相流速，缩短分析时间，提高分析通量[¨。通过性能优 准和规范。因而高效、高灵敏地分离分析中药这个复 越的色谱柱，精确梯度控制的超高压液相色谱泵，低 杂的黑箱体系．是解决这些难点和热点问题的必由 扩散、低交叉污染的自动进样系统及高速检测器使 之路。为了更好地解决这些难题，我们实验室购买了 超高效液相色谱的峰容量、分析效率、灵敏度较常规 世界上第一台超高效液相色谱仪，其高效率、高灵敏 度的特点，在复杂黑箱体系中药的分离分析中发挥 高效液相色谱(HPLC)有了很大的提高，为复杂体系 的分离分析提供了良好的平台，为代谢组学、蛋白组 了重要的作用。 学的研究提供了方便的条件。目前，UPLC已用于代 一、uPLC在中药分析中的基本特点 谢产物的高通量筛选【2】，痕量杀虫剂的分析【圳，生物 1．绫堑金盘吐圃 组稿日期：2006—04—20 中药成分十分复杂，需要高效分离分析其复杂 修回日期：2006-C16-旬5 ★ 点项目：中药药效组分的指纹图谱分析的方法研究，负责人：梁逸曾。 ★★ 分中药的研究，Tel：041lEmjl：li锄鲫@dicp．ac-cn。 J砸 [乳删Sc拓，lce∞d死c^加b删r，出m幻，l旷‰砌幻删吼妇se胁如i聊田ld朋蕊砌胁如Ⅱ] 世界科学技术一中医药现代化★组分中药系统研究 的组分，在我们的标准组分分析过程中，常规的 HPLC一般需要运行1h以上样品组分才能得到较好相同分离机制条件下，主要转换流速、进样量及流动 的分离，如图l(b)，使用HPLC在40111in完成分析，相梯度条件，本实验中，根据转换软件，如图l(a)， 共35个峰，而采用UPLC分析时，只需一半甚至更短 的时间就能得到更好的分析结果，如图1(a)，该样品 在20min内就完成分析，共39个峰。如仅考虑与 HPLC相同的分离效果，可提高流速，进一步缩短U— PLC的分析时间。 范围内及保证分离度的情况下。UPLC可适当增大流 2．增加坚容量，提高灵敏度 梯度条件下UPLC的峰容量变化已有报道，该报完成分析，如图3(c)。 道以小分子药物为研究对象，认 为梯度变化时间，流动相流速， 035； 025j 色谱柱长度对峰容量影响最大。 寻o·15i