遗传学实验 3.pptVIP

遗传学实验 宁波大学生命科学与生物工程学院 生物科学与技术系 实验目录 实验一：减数分裂的观察 实验二：果蝇杂交实验 1、果蝇培养及主要性状观察 2、果蝇的单因子杂交实验 3、果蝇的双因子杂交实验 4、伴性遗传 5、三点测交 实验三：果蝇唾液腺染色体的制备与观察 实验四：核型分析 实验五：同工酶技术 实验六：DNA的提取和检测 实验七：PCR技术 实验一：减数分裂的观察 实验目的：掌握减数分裂制片方法和技术； 观察并熟悉减数分裂各期染色体的特征。 材料：蝗虫精巢 步骤： 捕捉雄性蝗虫，解剖取出精巢，Carnoy固定液（无水乙醇: 冰醋酸=3:1）固定三小时，70%酒精保存。实验时先在一张干净的载玻片上滴1滴醋酸洋红，然后取一根精细管，放在醋酸洋红染液中染色5－10分钟，盖上盖玻片后压片（指压法，笔头敲击）观察。 注意压片时要小心，避免压破玻片，并尽量使材料散开，以免细胞重叠影响观察。 减数分裂各期特征： 前期I： 1、细线期特点：染色质凝集，染色体呈细长单条线状，盘绕成团，此时染色体已经过复制，但看不出是成双的。 2、偶线期特点：各对同源染色体配对（联会），结果细胞中的染色体由2n单价体变成了n条二价体。 1、细线期和2、偶线期 3、粗线期特点：又称重组期，开始于同源染色体配对完成后，n个染色体（配对的染色体称二价体）进一步变短变粗，SC（联会复合体）仍然存在，同源染色体的非姊妹染色体间可以发生局部交叉和交换，核仁大。 3、粗线期 4、双线期特点：又称合成期，可见四分体。染色体进一步缩短，组成二价体的两条同源染色体表现相斥而分离，但由于同源染色体之间的交换尚未完成，因而在不同的二价体上，在不同的部位，不同程度出现交叉现象，使二价体成为“X、V、8、0”等形状。 4、双线期 5、终变期特点：又称再凝集期。四分体较均匀地分布在核中，交叉向染色体臂的端部移行，称为端化。染色体凝集成短棒状。 5、终变期 中期I： 纺锤体形成，排在赤道板上的二价体开始分离，交叉端移。 后期I： 二价体中的同源染色体分开，真正减数。末期I： 前期II：中期II：具有两个染色单体的染色体 排在赤道板上。 后期II： 着丝粒纵裂，姐妹染色单体分开。 末期：染色体解旋，核膜重建等。 实验报告 根据你所观察的结果绘制蝗虫精巢减数分裂过程中的染色体图像 实验二：果蝇杂交实验 1、果蝇培养及主要性状观察 一、遗传学实验常用的五个果蝇品系： 品系 体色 翅形 眼色 刚毛 野生型： 灰身、长翅（翅过体）、 红眼、 直刚毛 黑檀体： 黑身、长翅（翅过体）、 红眼、 直刚毛 白 眼： 灰身、长翅（翅过体）、 白眼、 直刚毛 小 翅： 灰身、小翅（翅近体）、 白眼、 焦刚毛 残 翅： 灰身、残翅（一点翅）、 红眼、 直刚毛 刚毛类型： 二、雌雄果蝇的鉴别： 性别 体型 腹部末端 背部条纹 性梳 雌性 大 无色、端尖 7条（可见5条） 无 雄性 小 黑色、钝圆 5条（可见3条） 有 性梳：雄果蝇前翅第5节跗节上10根象梳子的棕毛 三、果蝇培养基的配制 （一）生活史： 卵——幼虫——蛹——成虫。 三、果蝇培养基的配制 （二）玉米粉培养基配方： A：蔗糖 13克+琼脂 1.5克+水 80毫升 B：玉米粉 17克+水80毫升 C：酵母粉 1.4克 先将A煮沸，使琼脂融化，然后将B加到A中，煮沸后加约1毫升丙酸（抑菌），待稍冷却后再加入C，搅拌均匀后分装。 三、果蝇培养基的配制 （三）注意事项： 配制培养基前先要对指管及棉塞进行消毒处理，121℃ 25分钟； 分装时培养基不要碰到管壁； 酵母粉可以等到玉米粉煮沸后再加，这样可以避免高温使酵母失活； 培养基刚配好后，管壁上会有许多冷凝水，此时不要急于把果蝇放进去，以免造成果蝇死亡； 5~6对果蝇 / 管。 四、果蝇杂交验证遗传规律 黑檀体、小翅 培养 7～8天后↓杀死亲本 子代