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落新妇根不同极性部分及单体抗氧化活性研究 预投杂志：中国中药杂志、中草药、食品科学 请老师帮忙筛选一个 落新妇根不同极性部分及单体抗氧化活性研究 摘要：目的：研究中不同部的抗氧化活性。方法：采用ABTS、DPPH自由基及还原性反应体系，利用分光光度法测定的在不同浓度下的抗氧化能力。结果：抗氧化能力最强，在浓度为0.62mg/mL时，最大清除率为DPPH测定中，正丁醇层的抗氧化能力最强，在浓度为0.62mg/mL时，最大清除率为在浓度为0.62mg/mL时，测得的层总酚含量最高，为（μg/20mg）。结论：的不同对、DPPH自由基均具有强的清除还原能力，其果与浓度呈良好的量效关系。关键词：， 随着科学技术的飞速发展，人们的保健意识也在日渐加强。近年来，大量医学研究表明：人体的多种疾病和过早衰老,都是由于体内存在过多自由基造成的。抗氧化剂能够清除自由基，有延缓衰老和减少疾病发生等作用。然而，人工合成的抗氧化剂在清除自由基的同时，会不可避免地产生一些不良的负作用，而从天然产物中提取的抗氧化剂由于具有高效、无毒等特点，已倍受国际社会的青睐，也成为了科研工作者们一个重要的研究方向。本文通过建立三个体外抗氧化模型综合考量了落新妇根的抗氧化能力，为更好的开发利用此药提供了理论依据，也为天然抗氧化剂的研发开创了一种新资源。 材料与方法 1.1实验样品来源 药材采自临江 ，经吉林农业大学园艺学院胡全德教授鉴定为虎耳草科落新妇属落新妇根。 1.2仪器 型号76新世纪紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；百灵LA114型电子天平（110g/0.0001g）（常熟市百灵天平仪器有限公司）；电子计数天平（500g/0.001g）（金羊天平仪器厂）；KQ—250DB型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；101—2A型数显电热鼓吹干燥箱（上海锦屏仪器仪表有限公司通州分公司）；旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；移液枪（20ul）；水浴锅。 1.3试剂 DPPH溶液，蒸馏水，无水乙醇，甲醇，ABTS，过硫酸钾，铁氰化钾，磷酸盐缓冲液（PH=6.6），三氯乙酸，三氯化铁，VC 2 实验方法与步骤 2.1药材的提取 2.1.1药材不同极性部分的提取 将2.1 kg干燥的药材粉碎，依次用10倍量，8倍量，6倍量的50%乙醇浸泡过夜后，超声提取30min，过滤，合并滤液，减压浓缩,得总提物。在分液漏斗中将落新妇根总提物加水混悬后，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇溶剂进行萃取，蒸干，得石油醚层提取物6g，乙酸乙酯提取物28g,正丁醇提取物65g，水层提取物396g，备用。 2.1.2 岩白菜素的提取及结构鉴定 落新妇根总提物经正丁醇溶剂萃取后，得正丁醇萃取液，放置，待其达到饱和状态时，析出无色方晶5g。无色方晶熔点为 234～236℃，经TLC、HPLC测定与标准岩白菜素一致,故鉴定为岩白菜素。 2.2 ABTS法测定抗氧化活性 2.2.1样品溶液的制备 分别精确称取干燥至恒重的总提取物、石油醚层、乙酸乙酯层、正丁醇层、水层提取物及岩白菜素30mg,用水定容于10mL容量瓶中，配成浓度为3mg/mL的样品母液，将样品母液用水逐级稀释成浓度为0.018mg/mL，0.037mg/mL，0.075mg/mL，0.15mg/mL，0.31mg/mL，0.62mg/mL的样品溶液备用。 2.2.2 ABTS+·溶液的制备 5mL,14mM的ABTS和5mL，4.9mMk2S2O8混合产生ABTS+·,黑暗中静止16h，使用之前用乙醇稀释工作液，要求其在734nm波长下的吸光度为0.70±0.02。 2.2.3 样品测定 取3ml样品溶液加入158μLABTS+·(Asample)，用乙醇做空白，158μLABTS+·和3ml水为标准液(Acontrol)，反应6min后在734nm波长下测定吸光度，用VC作对照。 清除率(% ) = [ (AControl - ASample ) /AControl ] ×100% 2.2.4 半数抑制率的计算 抑制DPPH溶液，避光备用。 2.3.3 样品测定 取样品溶液按表1加入反应液，摇匀后于室温避光静置30min，在515nm处测定吸光度值。用VC作对照。 表1样品溶液加样表 Table.1 Composition of total extract, aether petrolei extract, EtOAc extrace, BuOH extract reaction solution A 3mL无水乙醇+3mlDPPH·溶液 B 3mL样品溶液+3mlDPPH·溶液 C 3mL样品溶液+3ml无水乙醇 2.3.4 半数抑制率的计算 3结果与讨论 3.1 抗氧化能力测定结果 3.1.1 ABTS