铁离子增强青蒿琥酯抗癌作用及改变癌细胞死亡方式研究.PDFVIP

andHerbal ·1528· 中草焉ChineseTraditional Drugs第39卷第10期2008年lo月 铁离子增强青蒿琥酯抗癌作用及改变癌细胞死亡方式研究 苗立云1，张祖贻2 210009) (1．南京大学医学院附属鼓楼医院呼吸科，江苏南京210008，2．东南大学附属中大医院呼吸科，江苏南京 摘要：目的研究青蒿琥酯的抗肺腺癌细胞的作用与全铁转运蛋白的关系以及青蒿琥酯诱导细胞死亡的方式。 方法 利用MTT比色法观察不同质量浓度青蒿琥酯对培养的肺腺癌细胞在应用或不用全铁转运蛋白预处理的 情况下48h后的抑制率和ICso；并通过细胞形态学观察、DNA电泳、流式细胞仪分析肺腺癌细胞的死亡方式。结果 48 h单纯青蒿琥酯组对肺腺癌的IC；。为53．21 pg／mL，单纯青蒿 pg／mL，用全铁转运蛋白处理后的lC50为12．41 琥酯组，48h后细胞体积缩小，新月体形成，DNA电泳呈梯形，流式细胞仪分析显示亚G，峰；用全铁转运蛋白处理 000 000 后，24h细胞体积增大肿胀，染色质分散、边集，DNA电泳仅在1bp和2 bp见条带，流式细胞仪分析无亚 G。峰，与对照类似。结论全铁转运蛋白可增强青蒿琥酯的抗肺腺癌细胞的作用，加快癌细胞的死亡速度，两者联 合可诱导癌细胞以胀亡的方式死亡。 关键词：全铁转运蛋白#铁离子；青蒿琥酯；肺癌，凋亡；胀亡 中田分类号：R286．91 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)10—1528—05 青蒿素(artemisinin)是我国首次从菊科蒿属培养液稀释；全铁转运蛋白(为铁离子进入细胞的 (艾属)黄花蒿中分离、鉴定出的抗疟药物[1]。近年 来，国内外研究[2’3]均显示青蒿素类药物具有抗癌作 用，但Efferth等[4]发现，55个细胞系中，最不敏感 的是非小细胞肺癌。早期研究表明，青蒿素类的抗疟 仪(上海万达生物工程公司)；透射电子显微镜 机制与疟原虫体内铁离子有关[1．5]，而癌细胞的生 长、增殖甚至耐药[6]均与高表达转铁蛋白受体有关， (FACSCalibur型，B—D公司)。 研究初步表明转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性 1．3肺腺癌细胞经全铁转运蛋白预处理后，青蒿琥 具有增效作用[7】。为此设计本试验，原本是为证实青 酯对其增殖的影响：细胞分组为(1)单纯青蒿琥酯 蒿素类药物的抗癌作用与胞内铁离子浓度有关，但 组，青蒿琥酯的干预终质量浓度为200、100、50、25、 在试验中发现，癌细胞的形态变化与预先认定的有出 12．5、6．125、0弘g／mL(0pg／mL为该组的空白对 入，故而增加试验内容，试图探讨原因。结果显示青蒿 照)；(2)全铁转运蛋白组，全铁转运蛋白质量浓度 琥酯的抗癌作用与胞内铁离子浓度有关，当增加癌细 为100 pg／mL，青蒿琥酯质量浓度同(1)组。取对数 胞内铁离子后，可加快癌细胞的死亡速度，改变其死 生长期的人肺腺癌细胞系LTEP—a一1，计数后接种 亡方式。本实验提供了一种新的抗癌的思路，若青蒿 于96孔培养板，使其终浓度为1×105／mL，培养12 素类药可用来抗肿瘤，对于中晚期贫血的肿瘤患者， 可给予铁剂纠正，同时联合青蒿素类药物加速癌细胞 养液；(2)组换液加入含全铁转运蛋白的10％FCS 死亡。 的RPMI一1640培养液，各组继续培养3h，(1)、(2) 1材料与方法