牛传染性鼻气管炎病毒重组gE蛋白.docVIP

牛传染性鼻气管炎病毒重组gE蛋白 间接ELISA诊断方法的建立* 中国生物工程杂志China Biotechnology, 2005, 25(12):29～33 王海燕1，2朱远茂1薛飞1**童光志1赵立平1相文华1韩文瑜3 （1 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001) (2 哈尔滨医科大学动物学部哈尔滨1500863 吉林大学农学部长春130062） 摘要以重组牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白，经纯化后作为诊断抗原建立了检测牛血清特异性gE抗体的间接酶联免疫吸附试验，确定其最佳包被量为每孔1.075μg。样品稀释度为1:40，兔抗牛IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1∶5 000。判定标准为样品OD值大于0.582为阳性，小于0.472为阴性,在0.472与0.582之间为可疑。经抗特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高、重复性好。在403份血清样品中，进口试剂盒检出234份阳性样品，该诊断方法检出248阳性样品，与进口试剂盒的符合率为94.3％，但该诊断方法检出率更高。在43份血清样品中，中和试验检出24份阳性样品，该诊断方法检出28份阳性样品，与中和试验的符合率为85.7％。应用该诊断方法调查了我国部分地区IBRV的感染率，发现这些地区的IBRV感染率为68.7％。 关键词牛传染性鼻气管炎牛疱疹病毒I型糖蛋白gE酶联免疫吸附试验 收稿日期：2005071