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附录剩余白细胞数测定方法———普通光学显微镜计数法标准的附录quot原理该方法通过用普通光学显微镜测定经过白细胞滤器过滤后的血液成分中的剩余白细胞数来评价滤器的白细胞滤器或吸附效果。试验仪器、试剂与材料光学显微镜、amp容样量计数板、结晶紫染液’quotamp的结晶紫溶解于体积分数为quot乙酸溶液即-./012304、溶血剂、可调微量移液器quotamp5quotamp、amp5quotamp、微量移液头精确到体积6amp、塑料试管、直径789培养皿、滤纸。:步骤:’quot血液样品制备对lt型用血库保存quot5gt内的全血或红细胞悬液quot单位9amp血液抗凝剂对lt型用血库保存quot5内的新鲜血小板悬液quot单位quot单位全血分离制备的混合血小板或单采血小板。通过一管路与去白细胞滤器连接在quot9净压差下使血液流过去白细胞滤器流出的血液收集到一洁净的称量容器内即得血液样品测定过滤后血液样品的体积。注单位血液的公称量9amp不包括血液抗凝剂的含量。:’剩余白细胞计数将:’quot过滤后的血液样品混匀。取quotamp全血或红细胞悬液其细胞比容A82应小于B加入含6amp溶血剂的塑料管中反复吹打几次直至微量移液头上不再附有红细胞。然后加:Bamp结晶紫染液于上述混合液中混匀最终体积为amp。最quotamp血小板加入含6amp结晶紫染液的塑料试管中反复吹打几次直至微量移液头上不再附有血小板最终体积为amp。平行操作:管。在计数板上加盖玻片将样品注满计数室不可溢出然后将计数板置于附滤纸的培养皿内加盖静置934后将计数板置于显微镜下对白经细胞计数。??776quot??第九编医疗机械设备质量验收规范与相关标准quot结果的表示剩余?紫赴齛mp’……………………………式中—管样品白细胞计数平均值个—过滤后血液成分的体积amp—供计数血液样品的体积—换算系数。注宜使用无滑石粉手套以免将滑石粉颗粒误认为白细胞。-实验室确认结晶紫染色结果可用未去除白细胞的血液成分作对照。由于在冷藏过程中白细胞形态变异可能影响计数精确度。quot计数方法精确性的论证可使用已知白细胞浓度的红细胞悬液用几乎不含白细胞的红细胞悬液通过-套滤器串联过滤将样品系列稀释用该方法计数将计数值与期望值比较。.该方法在白细胞浓度低于个白细胞/时其精确??尚不清楚。??.??医疗机械设备安装工程质量验收规范与故障诊断及维护维修实务全书附录剩余白细胞数测定方法———荧光显微镜计数法仲裁法标准的附录quot原理该方法通过用荧光显微镜测定经过白细胞滤器过滤后的血液成分中的剩余白细胞数来评价滤器的白细胞滤除或吸附效果。试验仪器、试齐与材料quot荧光显微镜蓝色激发光波长为amp’amp。’amp容样量计数板计数室体积为’amp计上、下两个计数室内的白细胞总数。-荧光试剂./溴化丙啶./’0、柠檬酸钠quotampamp0和1234567quotampamp-amp。加quotampamp蒸馏水溶解经amp孔径的微孔滤膜过滤制得./荧光试剂。储存于8暗处。-步骤-quot血液样品制备同9-quot。-剩余白细胞计数取quotampamp过滤后混匀的血液样品与./荧光试剂以quot或适当比例稀释静置amp3。用’amp容样量计数板在荧光显微镜amp’amp波长下对发出桔红色荧光的白细胞计数。平行操作-管。结果的表示剩余白细胞数:ltquotamp-quot…………………………式中—-管样品白细胞计数平均值个—过滤后血液成分的体积lt—供计数血液样品的体积’quotamp-—换算系统quot:quotamp-。??quotamp’quot??第九编医疗机械设备质量验收规范与相关标准附录游离血红蛋白测定邻联甲苯胺法标准的附录quot原理血红蛋白是一种色蛋白其相对分子质量为amp’。经邻联甲苯胺氧化后显色它的显色反应分两期第一期氧化产物呈蓝色反应在左右进行吸收峰在-.。第二期氧化产物呈黄色反应在quotamp吸收峰在amp-.。该方法是将血液通过滤器收集经滤器过滤的血液成分并离心取上层血浆对其中的血红蛋白测定来评价滤器对红细胞的损伤。/试验仪器、试剂/quot仪器恒温水浴、分光光度计、离心机。//试剂邻联甲苯胺溶液称取邻联甲苯胺/amp0溶于冰乙酸1.2中加蒸馏水稀释至quot.2。该溶液在冰箱可保存’周3quot/周保存期中颜色会逐渐变暗如颜色太深时应重新配制、体积分数为quot4的过氧化氢溶液新鲜配制、体积分数为quot4的乙酸溶液、血红蛋白5应用标准溶液〔5quot.062〕。操作步骤quot样品制备取经78型去白细胞滤器过滤的全血或红细胞悬液quot.2在quotquot103quot/0离心力下离心/.9-吸出上层血浆或上清液取/quot2血液或上清液置于塑料试管中分