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病毒与人类健康 总课件研究报告.ppt

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考试安排;病毒与人类健康;1、1898 伊万诺夫斯基和贝杰林克通过他们创造性工作发现了烟草花叶病毒,从而开创了病毒学独立发展的历程。 2、狂犬病——最早记载的动物病毒病 3、1884年 法国巴斯德Pasteur首次研制狂犬病疫苗 4、病毒学发展经历了4个阶段:经验阶段(病毒的发现)、机体水平研究阶段、细胞水平研究阶段、分子水平研究阶段。;二、病毒的分类与命名; ;三、病毒的分类依据;病毒(virus)的定义 病毒是由蛋白质和核酸组成的最小的生命形态,寄生于动物、植物或细菌的细胞中,只能在宿主细胞内才能复制的微生物。; ;核心(core):由病毒核酸及其结合蛋白组成,并被壳体包围着的病毒体的中心部分。 核衣壳(nucleocapsid):病毒核心与衣壳的总称。 囊膜(envelope): 覆盖在病毒核衣壳外的脂蛋白膜。其组成成分主要来自宿主细胞,是病毒的核衣壳在感染细胞内穿越核膜或在感染细胞表面“出芽”时由细胞膜获得。 纤突(spike)或突起(peplomer):病毒囊膜表面的糖蛋白突起。;病毒的三种壳体结构 1、二十面体对称(icosahedral symmetry) 2、螺旋对称(helical symmetry) 3、复合对称壳体(complex symmetry);基本化学组成:核酸、蛋白质 其它组成成分:脂类、碳水化合物、聚胺类化合物等 (1)病毒的核酸 同一种病毒碱基组成是恒定的,同科(属)的病毒核酸(G+C)含量相近, 不同科属者有所不同,核酸的G+C含量是病毒鉴定的一个指标。 病毒的核酸含量:核酸的分子量占病毒颗粒重量的百分比。 病毒核酸的类型:DNA、RNA ;(2)病毒蛋白质的功能 构成病毒衣壳和囊膜的重要成分 保护病毒核酸 参与病毒的吸附与侵入过程,决定病毒对宿主和组织的嗜性 构成病毒的表面抗原 构成病毒的血凝素 构成病毒的酶类;七、理化因子对病毒的作用 ;(1)温度( “喜冷怕热”) 作用机制:使病毒蛋白质,特别是病毒的表面蛋白质变性。 核酸对热的抵抗力较强。 影响因素:蛋白质、钙、镁、蛋白酶、核酸酶 温度的剧烈变化,尤其是反复冻融常可使许多病毒很快灭活。;(2)电离辐射 机制:电离辐射中的X射线和γ射线作用于其它物质后产生次级电子,次级电子再通过直接和间接作用,作用于病毒核酸(DNA或RNA)而使病毒失活。 单链病毒对电离辐射的灭活作用比双链病毒敏感约10倍。;(3)紫外线(主要作用于核酸) 机制: 使嘧啶碱基之间形成二聚体 DNA:TT、CT、CC RNA:UU 核酸链断裂 分子内或分子间交联 核酸和蛋白质之间的交联 核酸不能复制和转录,从而导致病毒的灭活,但病毒蛋白质的免疫原性仍保持。;;2、化学因子;(1)化学灭活剂 酶类 蛋白变性剂 氧化剂 酸、碱 其它化学试剂:福尔马林和亚硝酸等;酶类 核酸酶 破坏核酸 磷脂酶 破坏囊膜磷脂 蛋白酶:胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶等 pH 大多数病毒 pH 6-8 稳定 pH5.0 or 9.0 迅速灭活;脂溶剂 乙醚、氯仿、丙酮:灭活有囊膜病毒 氟里昂、正丁烷:抽提脂质和蛋白质,常用于病毒提纯;机制:与腺嘌呤、鸟嘌呤和胞嘧啶或蛋白质的胺基作用。 病毒的核酸和蛋白质都有破坏作用,但首先是作用于病毒的核酸 用于灭活病毒生产疫苗的甲醛浓度:0.05-0.2%;机制:烷化剂上的活性烷基使蛋白质分子上游离的-COOH、-NH2、-SH、-OH和核酸分子中的N发生烷基化作用,使病毒的蛋白质和核酸结构改变,功能丧失,从而被灭活。 种类:环氧乙烷、环氧丙烷、溴化甲烷、β—丙内酯、乙酰乙烯亚胺等 病毒学中的应用:气体消毒剂 灭活病毒,制备疫苗;石炭酸 阳离子去污剂:SDS、去氧胆酸钠 非离子去污剂:吐温-20、吐温-80、NP-40;石炭酸 剥离病毒粒子的蛋白质衣壳 吐温和去氧胆酸钠 破坏病毒的囊膜,但可保存病毒粒子原来的蛋白结构和抗原性。 SDS 剥离病毒粒子的蛋白质衣壳 使蛋白质降解为多肽 溶解病毒囊膜 NP-40 裂解病毒蛋白质; 能够减轻病毒保存过程中其他理化学因子对病毒的损伤,从而保持病毒的感染性、抗原性等生物活性的物质。 甘油: 在50%的甘油盐水,病毒可存活达几十天、几个月至几年(牛瘟病毒例外)。 二甲基亚砜DMSO:减少冷冻过程中微小冰晶的形成 ;八、病毒的保存 ;快速低温冻存 于病毒悬液内加入灭活的动物血清或其他蛋白质保护剂,最好再加一些DMSO(5%-10%),并迅

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