第四章酶enzyme.ppt

前 言 一、酶的研究历史 1、19世纪中叶对发酵本质的探讨： 1833年Payan 和 Persoz：淀粉糖化酶（diastase） 19世纪70年代 Pasteur：发酵是酵母细胞活动的结果。 1878年kühne: Enzyme----- “在酵母中” 1897年Büchner兄弟：用酵母提取液实现发酵获得了1907年的诺贝尔化学奖。 2、关于酶的化学本质的认识： 1926 J.B Summer：首次从刀豆中得到脲酶结晶，并证明其化学本质是蛋白质，J H Northrop和W M Stanley 分享了1946年的诺贝尔化学奖。 1982 Thomas R Cech从四膜虫发现rRNA的自身催化作用，并提出了核酶（ribozyme）的概念。 3、酶促动力学 Michaelis 和 Menton 1913年米氏学说。 邹承鲁 60年代初，提出酶蛋白必需基团的化学修饰和活性丧失的定量关系公式和确定必需基团数的方法，分别被称为“邹氏公式”、“邹氏作图法”。还提出了酶活性部位的柔性学说。 酶是由生物细胞合成的以蛋白质为主要成分，对底物起高效催化作用的生物催化剂。还有一类具有催化作用的核酸-核酶（ribozyme） 第一节 酶的结构与功能 一、以酶结构、组成及功能分类 单体酶（monomeric enzyme） 寡聚酶（oligomeric enzyme） 多酶体系（ multienzyme system ） 多功能酶（multifunctional enzyme ）或串联酶（tandem enzyme） 二、酶的分子组成 1、金属离子为辅助因子的酶 金属酶：羧肽酶（Zn+2）和黄嘌呤氧化酶（Mo+6）； 金属激活酶：各种激酶和核酸酶（Mg2+） 金属离子的作用：参与三元络合物（E-M-S）起稳定酶蛋白构象和多种催化作用。 2、小分子有机化合物的辅助因子 辅基: 与酶蛋白共价结合, 不容易被透析除去，如黄素和生物素等辅基； 辅酶:与酶蛋白以非共价键疏松结合, 容易被透析除去，如TPP、NAD等； 辅基或辅酶的作用:传递电子、氢或基团。 二、酶的活性中心（active center） 1、活性中心概念： 能结合并催底物使之发生化学变化的位于酶分子上特定空间结构区域。辅助因子参与酶的活性中心。 2、酶活性的必需基团（essential group） （1）概念：间接或直接与酶催化活性相关的多肽链上某些氨基酸残基的功能基团。 酶活性中心必需基团： 结合基团(binding group) 催化基团(catalytic group) 活性中心外必需基团 一些酶活性中心的氨基酸残基 酶 残基总数 活性中心残基 牛胰核糖核酸酶 124 His12, His119, Lys41 溶菌酶 129 Asp52, Glu35 牛胰凝乳蛋白酶 245 His57, Asp102,Ser195 牛胰蛋白酶 238 His46, Asp90, Ser183 木瓜蛋白酶 212 Cys25, His159 弹性蛋白酶 240 His45, Asp93, Ser188 枯草杆菌蛋白酶 275 His46, Ser221 碳酸酐酶 258 His93-Zn-His95 His117 第二节 酶促反应的特点与机制 一般催化剂的特点 酶催化作用的特点 酶催化作用的机制 一、一般催化剂的特点 催化效率高 反应前后质量不变 催化热力学允许的反应 加速可逆反应的进程不改变反应的平衡点 二、酶促反应的特点： 酶的高度催化效率（本质） 酶的催化具有高度特异性 酶促反应的条件温和 酶促反应无副反应 酶的催化受调控 1、反应过程： 2、酶促反应的能力学基础 化学反应速率的依赖因素： ? 分子间碰撞濒率； ? 有效碰撞分子的百分数。 几个概念： ? 能阈: 反应物分子发生化学变化所需最低能量。 ? 活化分子: