[农业]饲料中粗蛋白测定操作规程.doc

饲料中粗蛋白测定操作规程 一、范围 本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。 本标准适用于本公司原料、半成品、成品的检测。 二、引用标准：G B/T 6432 一 94原理凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6. 25，计算出粗蛋白含量。试剂硫酸(GB 625):纯，含量为 98 % ，无氮。4. 2 混合催化剂:0. 4 g硫酸铜(5个结晶水GB 665) 6 g硫酸钾(HG3- 920均为纯，磨碎混匀。4.3 氢氧化钠(GB 629):纯40%水溶液(M /V)4.4 硼酸(GB 628):纯2%水溶液(M )。4. 5 混合指示剂:甲基红(HG3- 958)0. 1%乙醇溶液，甲酚绿(HG 3- 1220)0. 5%乙溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月4.6 硫酸标准溶液:法标定，按GB 601 制备。 0. 1 mol/L 酸()标准溶液: mL 硫酸(GB 622)，分析纯，注蒸馏水中。4. 7 蔗(HG 3- 1001):分析纯。4.8 硫酸(GB 1396)：分析纯燥。仪器设备实验室用样品粉碎机分样筛:孔径 0.45 mm ( 4目)。5.3 分析天平:感量0001 g 5.4 消炉5.5 滴定管:酸式25 mL,5.6 消化管:250 mL,5.7 凯氏蒸馏装置:。5.8 锥形瓶: 250 mL,试样的选取和制备 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200 g，粉碎后全部通过 4目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。 7.2.1 接通进水口、排水口，注意排水胶管出水口，不得高于仪器底平面，同时关闭排水阀门。 7.2.2 进水胶管插入蒸馏水桶，进碱胶管插入40%NaOH溶液桶。注意检查蒸馏水桶要装足水，氢氧化钠桶装足氢氧化钠。 7.2.3接通电源，电源线内必须有良好的接地线，同时必须保持同仪器型号相同(注意接通电源时，必须关闭汽、碱开关)。 7.2.4 开自来水龙头，使自来水经过给水口进入冷凝管。注意水流量以保证冷凝管起到冷却作用为止。 7.2.4待红色指示灯亮，开汽开关直至蒸汽导出管放出蒸汽，关汽开关。 7.2.5 在蒸馏导出管托架上,放上已经加入50ml接收液(2%硼酸50ml和3滴混合指示剂)的锥形瓶。向下压右侧手柄（或蒸馏导出管托架）使蒸馏导出管的末端浸入接收液内。 7.2.6 在消化完全冷却后的消化管内，逐个加l0ml左右蒸馏水稀释样品。 7.2.7 向上提左侧手柄，将消化管套在防溅管密封圈上，注意转保持接口密封，关上防护罩。 7.2.8 加碱：开碱开关，加入适量NaOH溶液至蒸馏液碱性颜色变黑为止，关碱开关。(注意：如仪器连续数天停止使用，必须先吸空胶管和碱泵内的碱液，然后用10%的盐酸或硼酸溶液过滤胶管和碱泵;再用蒸馏水过滤一次即可)。 7.2.9 开汽开关，开始蒸馏，直至氨气全部蒸出(全量蒸馏接收液体积约为170ml~200ml)。先将接收瓶取下，取洗瓶冲洗蒸馏导出管的末端，稍等片刻，左手向上提左侧手柄，右手戴隔热手套将消化管套拿离防溅管密封圈，再关汽开关，同时将接收瓶置于滴定处。如此重复2.3.5至2.3.9步骤进行下一试样。 7.4 滴定： 吸收氨后的吸收液，用标定后的硫酸溶液进行滴定，溶液由兰绿色变为灰红色为终点。 7.5 空白测定： 用0.1克蔗糖（分析纯）代替样品或不加样品作空白测定。 7.6 测定结果计算: 7.6.1 测定计算公式: 粗蛋白质%=(V2-Vl) ×C×0.0140×K×100÷W 式中：V2－滴定试样时消耗酸标准溶液的体积 (ml) V1－滴定空白时消耗酸标准溶液的体积 (ml) C－ 酸标准溶液的物质的量浓度C(1/2H2SO4) K－氮换算成粗蛋白质的系数（一般为K=6.25） W－试样质量 (g) 7.6.2重复性 当粗蛋白质含量在25%以上时，允许相对偏差为 1%当粗蛋白质含量在10% - 25%之间时，允许相对偏差为2 %当粗蛋白质含量在10%以下时，允许相对偏差为3%: N%=( V2- Vl) ×C×0.0140×100÷W 式中：V2－滴定时消耗酸标准溶液的体积 (ml) Vl－滴定空白时消耗酸标准溶液的体积 (ml) C－ 酸标准溶液的物质的量浓度C(1/2H2SO4) W－硫酸铵质量 (g) 7.7.3 N%应在21.19±0.2%；该范围说明仪器误差在可允许的范围内，仪器工作状态正常。