[医药卫生]8。核酸化学.pptVIP

核酸研究史上的大事 1868－1869年 Friedich.miescher 从脓细胞中提取‘核素’ 1943年，E .Chargaff 的工作推理出碱基配对的理论。 1944年 Avery等肺炎球菌转化试验证明DNA是遗传物质 1953年，Watson-Crick 建立了DNA的双螺旋结构模型。 1958年， Crick 提出遗传信息传递的中心法则 1968年 M.W.Niberg 发现遗传密码 1975年 H.M.Temin 和 D.Baltimore 发现反转录酶 1981年 W.Gilbert 和 F.Sanger 建立 DNA 测序方法 1985年 PCR 技术的发明 1990年美国启动 人类基因组计划( HGP ) 1994年中国人类基因组计划启动 2001年 美、英等国完成人类基因组计划基本框架 核酸的种类 核 酸 分 布 脱氧核糖核酸（DNA） DNA分子含有生物物种的所有遗传信息，分子量一般都很大。 DNA为双链分子，其中大多数是链状结构大分子，也有少部分呈环状结构。 核糖核酸（RNA） RNA主要是负责DNA遗传信息的翻译和表达，分子量要比DNA小得多。RNA为单链分子。 根据RNA功能，可以分为: mRNA（Messenger RNA） tRNA（Transfer RNA） rRNA（Ribosome RNA）三种。 核酸的分子结构 DNA的分子结构 （一）DNA的一级结构 概念：DNA的一级结构是指DNA分子中脱氧核苷酸的排列顺序。 不同的DNA分子（或片段）其一级结构不同，即脱氧核苷酸排列顺序不同，也就是碱基排列顺序不同。 基本结构单位：脱氧核糖核苷酸 连接键：3’，5’－磷酸二酯键 书写及阅读方向：从5端到3端 DNA的二级结构 概念：DNA的二级结构是指DNA的双螺旋结构1953年，J. Watson和F. Crick 在前人研究工作的基础上，根据DNA结晶的X-衍射图谱和分子模型，提出了著名的DNA双螺旋结构模型，并对模型的生物学意义作出了科学的解释和预测 DNA DNA DNA双螺旋结构的要点 （2）碱基位于螺旋的内侧，磷酸和脱氧核糖基位于螺旋外侧。碱基环平面与螺旋轴垂直，糖基环平面与碱基环平面成90°角 （3）螺旋横截面的直径约为2 nm，每条链相邻两个碱基平面之间的距离为3.4 nm，每10个核苷酸形成一个螺旋，其螺矩高度为34 nm。 （4）形成双螺旋的力是链间的碱基对所形成的氢键。碱基的相互结合具有严格的配对规律，即腺嘌呤（A）与胸腺嘧啶（T）结合，鸟嘌呤（G）与胞嘧啶（C）结合，这种配对关系，称为碱基互补。A和T之间形成两个氢键，G与C之间形成三个氢键。在DNA分子中，嘌呤碱基的总数与嘧啶碱基的总数相等。 DNA碱基对 DNA双螺旋的稳定性 DNA双螺旋结构在生理条件下是很稳定的。维持这种稳定性的因素包括： 两条DNA链之间形成的氢键。 由于双螺旋结构内部形成的疏水区，消除了介质中水分子对碱基之间氢键的影响； 介质中的阳离子（如Na+、K+和Mg2+）中和了磷酸基团的负电荷，降低了DNA链之间的排斥力、范德华引力等。 改变介质条件和环境温度，将影响双螺旋的稳定性。 DNA的三级结构 概念：DNA的三级结构是指双螺旋进一步扭曲形成的更高层次的空间结构，也就是比双螺旋更为复杂的构象。DNA的三级结构包括线状DNA形成的纽结、超螺旋和多重螺旋以及环状的结、超螺旋和连环等多种类型，其中超螺旋是最常见的三级结构。 DNA三级结构 限制性内切酶（restriction enzyme） DNA的限制图谱 RNA一级结构 RNA一级结构的特点 mRNA一级结构的特点 真核细胞mRNA的3‘-末端有一段长达200个核苷酸左右的聚腺苷酸(polyA)，称为 “尾结构”，5’ -末端有一个甲基化的鸟苷酸，称为“帽结构”。 RNA的高级结构特点 RNA是单链分子，因此，在RNA分子中，并不遵守碱基种类的数量比例关系，即分子中的嘌呤碱基总数不一定等于嘧啶碱基的总数。 RNA分子中，部分区域也能形成双螺旋结构，不能形成双螺旋的部分，则形成突环。这种结构可以形象地称为“发夹型”结构。 RNA的高级结构特点 在RNA的双螺旋结构中，碱基的配对是A与U、G与C，但配对情况不象DNA中严格。G 除了可以和C 配对外，也可以和U 配对。G-U 配对形成的氢键较弱。不同类型的RNA, 其二级结构有明显的差异。 tRNA中除了常见的碱基外，还存在一些稀有碱基，这类碱基大部分位于突环部分. RNA的二级结构 tRNA的二级结构都呈“三叶草” 形状，在结构上具有某些共同之处，一般可将其分为五臂四环：包括氨基酸接受区、反密码区、二氢尿