2010年版中国药典微生物培训培养基的配制及质量控制.pptVIP

 培养基的配制及质量控制 2010年06月 一、培养基的配制 培养基是绝大多数微生物试验的基础。因此，培养基的质量是微生物试验成功与否的关键因素。适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。 ⑴培养基可按处方制备也可使用按处方生产的符合规定的商品化成品培养基，脱水培养基除附有处方和使用说明外还应注明有效期、贮存条件、适用性试验的质控菌株和用途。配制时应按使用说明上的要求操作，受潮结块不能使用，以确保培养基的质量符合要求。 ⑵配制培养基使用的容器应是玻璃器皿或搪瓷器皿如搪瓷筒、量筒、漏斗、三角烧瓶、刻度吸管、试管、培养皿等。使用的器皿应 洗净，用蒸馏水冲净，烘干后方可使用。禁用金属容器如铁、铜、铝容器，避免金属离子与培养基成分结合，生成有害物质，影响细菌生长。 ⑶培养基若于非洁净的玻璃器皿中制备，可能导致抑菌物质进入培养基中。抑菌物质可能是残留的玻璃器皿清洁用的清洁剂或之前玻璃器皿所盛装的物质。因此。应使用纯化水完全冲洗玻璃器皿以消除清洁剂和外来物质的残留，并进行清除污物的确认。 ⑷ 配制培养基最常用的溶剂是纯化水，特殊情况下需要用去离子水和蒸馏水，对热敏感的培养基应用灭菌水和无菌容器配制与分装，配制时若需加热助溶应注意温度不要过高 ⑸、对配制培养基的过程作详细的记录，记录内容包括：配制日期、培养基名称、成分、配制数量、质量监控结果等进行全面详细记录。 1、培养基的制备方法 称量 配制 分装 矫正pH  2、培养基的灭菌 灭菌方法及条件不当可直接影响培养基质量，培养基灭菌方法和条件，应通過无菌性试验和促生长试验进行验证，验证方法同《中國药典2010年版》附录灭菌法。。 不同种类培养基应采用不同的灭菌方法，配制好的培养基灭菌一般多用流通蒸汽灭菌和滤膜过滤除菌. 流通蒸汽灭菌 滤膜过滤除菌 3、培养基的贮藏 　　⑴商品化培养基应根据使用说明书上的要求进行储存。培养基标签上应标有批号，生产日期、有效期及培养基的有关特性。所采用的保藏和运输条件应使培养基最低限度失去水分并提供机械保护。 　　⑵配制好的培养基应保存在2～25℃避光的环境。若保存于非密闭容器中，一般在三周内使用；若保存于密闭容器中，一般在一年内使用，琼脂培养基不得在0℃或0℃以下存放，防止冷冻破坏凝胶特性。若培养基要长期保存，琼脂平板应密闭包装或置于密闭容器中以防止水分流失。 ⑶培养基灭菌后应立即取出，不得储藏在高压 菌器中，避免影响培养基的质量。 制备好的培养基应保存在2～25℃、避光的环境。 ⑷保存于密闭容器中，可防止水分流失以延长保存时间。 ⑸固体培养基灭菌后的再融化应在加热的水浴中或采用流通蒸汽进行，只允许一次，融化的培养基应放在45～50℃的水浴中，不得超过8小时。 二、培养基的质量控制 目前，许多实验室为了操作方便，多使用脱水 培养基进行配制或购买已制备好的分装于培养皿 或玻璃容器的商业培养基。 经实验室配制或由生产厂生产的培养基的质量高度依赖于其如何制备，采用不适宜方法制备的培养基将影响微生物的生长或复苏，从而影响试验结果的可靠性。 所有配制好的培养基均应进行验证，验证方法参照《中国药典2010年版》附录无菌检查或微生物限度检查项下有关规定进行。实验室配制的培养基的常规监控项目是外观、性状、pH、促生长试验、定期的稳定性检查以及培养基有效期的确定。 培养基的有效期是指已通过促生长试验的培养基在整个有效期内均需符合这些相应的标准。每批培养基储存的时间将取决于一定存放条件（包括容器和密封性）的培养基组成成分的稳定性。 当批培养基不符合促生长试验，应寻找造成不合格的原因。这个调查包括采取适当的行动以防止问题的重复出现。如果未找到原因或还没有解决有关培养基的促生长问题，那么任何不符合要求的批次均不能使用。 一些用于进一步鉴定微生物的诊断试剂，如革兰染色、氧化酶试验试剂等。它们与培养基相似点可能是质量控制试验。在试剂用于未知样品鉴定前，选择正确的标准质控菌，按使用说明