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高效液相色谱在药物分析中的应用进展 谢秋红 邵大志 （四平市中心人民医院 吉林四平 136000） 摘 要: 高效液相色谱法(High—Performance Liquid Chromatography，HPLC)是以液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。高效液相色谱对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，因而弥补了气相色谱法的不足。在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱分析的约占20%，而80%则需用高效液相色谱来分析。高效液相色谱已经广泛应用于药物的含量测定、组成分析、质量控制等方面，在药物分析中占主要地位。其特点是分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高、检测自动化、适用范围广、组分易回收、样品处理较简单。本文从以下几个方面综述了高效液相色谱法在药物分析中的研究进展。 关键词：高效液相色谱法 药物分析 应用 现代药学的迅速发展促进药物及其代谢物在机体内处置过程的研究不断深入，一方面对体内药物分析研究方法和手段提出了越来越高的要求，另一方面也推动了体内药物分析研究方法的蓬勃发展[1]。HPLC具有分离效能好、分析速率快，应用范围广等诸多优点，已成为药物分析中最重要的分析方法及医学研究与诊断常用的方法之一。如今，HPLC已成为反映世界各国药典水平先进性的指标之一[2]。 1. 高效液相色谱作为常规分析方法在药物分析中的应用 高效液相色谱法作为药物分析中的最主要的分析方法，常被作为常规分析检验方法而广泛应用[3]。近年来在这个方面的研究比较多，康自华等[4]针对近几年国际奥委会医学委员会公布的禁用表中新增药物及一系列利尿剂的相关化合物进行了研究，比较了不同的提取方法及回收率，建立了同时分析13种利尿剂的高效液相色谱测定方法，检出限小于5ng。张晓青等[5]采用反相离子对高效液相色谱法研究了唑来膦酸及其有关化合物的色谱分析与分离方法。该方法简单快速，不需进行复杂的样品处理，唑来膦酸与有关化合物的分离良好，适用于唑来膦酸的常规分析。另外，国内在这个方面的研究还应用在兴奋剂中几种易分解药物、乙酰螺旋霉素活性成分、血或尿中咪达唑仑及其代谢物、嘌呤类化合物等药物上[6]。这些研究充分利用了高效液相色谱的特点，并使之与其他检测方法联用，在最佳吸收峰、检出线、精密度上进行了研究。联用技术的发展，使之在药物分析生命科学领域的应用更具重要意义[7]。 2．临床生物样品分析及药代动力学研究 高效液相色谱法能同时进行分离和定量测定的优点在治疗药物检测和药物代谢动力学中体现地尤为突出[8]。为了达到药品应用的安全、有效、可靠，这就需要了解和研究药物及其制剂在体内过程（吸收、分布、代谢、排泄），以便研究药物的作用机制及药效学[9]。同时随着药物分析技术的不断进步和发展，可对人体和动物体内（体液、组织和血中）药物及其代谢物的浓度进行定量分析，它对药品的评价、指导临床合理用药和药代动力学研究均具有重要的意义和现实需要[10]。 高效液相色谱测定药物在肌体内的浓度，并结合一定的统计方法对数据进行处理可以对药物代谢动力学进行研究。刘湘新等[11]对家免单剂量静注和灌服儿茶素(Catcchin)25mg／kg体重各5只，用高效液相色谱法测定其血药浓度，房室模型分析表明，注给药后的药时数据符合无吸收二室开放模型。张祚新等[12]应用HPLC法测定了单次混饲口服氧氟沙星(10mg／kg)后，鲤鱼体内不同时问的血浆药物浓度，利用MCPKP药代动力学软件分析数据，其药代动力学特征符合一级吸收一室开放模型。结果表明，氧氟沙星适用于鱼类细菌性疾病的预防和治疗。李克等[13]建立了反相高效液相色谱法监测人口服地尔硫卓缓释片后血药浓度，监测了8名健康人口服盐酸地尔硫卓缓释片后的不同时间的血药浓度变化，计算了有关的药代动力学参数。结果表明，血药浓度在15～300ug／L范围内线性关系良好，最低检测浓度为3ng／mL，批内(n=7)及批间(n=5)测定相对标准偏差分别小于6.8%和8.4% ，回收率为91%～104 %。 高效液相色谱在药物代谢动力学上的研究主要是为药物代谢动力学软件提供数据，并最终通过药代动力学软件处理得到药物动力学参数，以便比较定量地去说明药物浓度与效应、疗效的关系，并通过这种方法分析药物对机体的作用情况，有利的指导药物的开发、研制及合理用药，以达到安全有效可靠的治疗。[14] 另外,近年来药物制剂的生物利用度(bio-availability) [15]和生物等效性(bioequivalence)已成为一个国际上瞩目的重要问题，它极大地影响着药品的发展及管理。由于分析技术的飞速发展，使得药学研究人员能测定药物及其代谢物在生物体液中仅为ng／ml的水平，因此有可能研究人体内药物吸收、分布、代谢和消除的动态过程