猪肉中莱克多巴胺的GC-MS分析1试验部分.PDF

猪肉中莱克多巴胺的 GC-MS分析 王成娟 摘要 ：本文建立了猪肉中莱克多巴胺的 GC-MS分析方法。样品用高氯酸溶液匀浆 ，进 行超声加热提取 ，在碱化的条件下用乙酸乙酯萃取 ，然后用稀盐酸反萃取 ，固相萃取小 柱净化 ，用 4%氨化甲醇溶液洗脱 ，洗脱液经氮吹仪浓缩 ，经 N,O-双三甲基硅烷三氟 乙酰胺 （BSTFA+TMCS 99 ︰1）衍生后进气质联用仪分析 ，外标法定量。 关键词 ：猪肉 ，莱克多巴胺 ，GC-MS ，外标法 ractopamine, C H NO , 337.85 CAS 莱克多巴胺 ，英文名称 分子式 18 23 3 分子量 ， 号 97825-27-7 β - , ，可溶于水和乙醇 ，属于苯乙醇胺类的 2 肾上腺素受体激动剂 能改变能量 , , 分配 提高肌肉生长速度 从而改善猪的体重和胴体瘦肉率。 β - 兴奋剂的检测方法很多 ，有酶联免疫法 ，气质联用法, 高效液相色谱法, 液质联用 2 法等。本文建立了猪肝中莱克多巴胺的 GC-MS分析方法 ，样品用甲醇超声提取 ，提取液经 固相萃取小柱净化 ，净化液氮吹仪浓缩至干 ，经 N,O-双三 甲基硅烷三氟乙酰胺 （BSTFA+TMCS）衍生后进气质联用仪分析 ，外标法定量。 1 实验部分 1.1 设备和试剂 : GC-MS3100 0.0001g 设备 气质联用仪 ，分析天平 （感量 ： ），超声波仪 ，酸度计 ，涡旋 振荡器 ，固相萃取仪 ，阳离子固相萃取小柱(SCX小柱 ，60mg,3mL) ，氮吹仪 ，离心机 ， 恒温箱 ；50ml 磨口玻璃离心管 ，5ml 磨口玻璃离心管 ，均具塞。10mL磨口具塞比色管 ， 容量瓶 ，胶头滴管 ，移液枪。 所有试剂 ，如未注明纯度 ，均指分析纯 ；所有实验室用水均为去离子水。 - 1- 99% BSTFA+TMCS 99:1 试剂 ：莱克多巴胺标准品（纯度≥ ），甲苯（分析纯 ），衍生试剂 （ ）， 高氯酸 ，碳酸钠 ，氯化钠 ，乙酸乙酯 ，盐酸 ，甲醇 （色谱纯 ），氨水 ，去离子水。 1.2 样品前处理 1.2.1 提取 称取粉碎好的猪肉肉馅 5g（精确到 0.01g）于 50ml离心管中 ，加入 10ml0.1mol/L 高氯酸溶液 ，于涡旋振荡器上涡旋 1min，放入超声波仪中超声 20min,取出置于 80℃恒温 箱中加热 30min ，冷却后以 5000r/min离心 5min，取上层清液。在残渣中再加入 10ml 0.1mol/L 高氯酸溶液 ，涡旋振荡 30s后离心 5min ，将两次上清液合并。用碳酸钠溶液 10% PH 10, 4g 10ml 1min （ ）调 至 加入 氯化钠 ，涡旋混匀 ，加入 乙酸乙酯 ，涡旋混合 ， 离心 5min，吸取上层有机相于另一离心管中 ；在残渣中再加入 10ml乙酸乙酯 ，涡旋混合 1min，离心 5min，吸取上层有机相合并提取液。然后于提取液中加入 4ml 0.1mol/L 盐 酸溶液 ，涡旋混合 1min ，离心 5min ，吸取下层溶液同样步骤重复萃取一次 ，合并两次萃 PH 2.0 取液 ，调 至 ，作为备用液。 1.2.2 净化 依次用 5ml甲醇、5ml水、5ml 0.03