手性药物的拆分——高效液相色谱(HPLC).ppt

Dalgliesh 三点相互作用 根据固定相的不同,与对映体之间存在以下几种作用 （1）过渡金属离子的手性配位作用 （2）π-π电荷转印相互作用 （3）包结络合作用 （4）氢键相互作用 （5）立体契合作用 1 手性固定相 第一类包括低聚糖，多糖及其衍生物，聚丙烯酰胺，聚丙烯酸酯等 a，纯有机聚合物 b，聚合物涂覆在无机载体上 c，接枝聚合物 第二类是把光学活性分子通过离子键或共价键连接到硅胶载体表面，应用的光学活性物质有氨基酸衍生物，冠醚，金鸡纳生物碱，糖类，胺类，酒石酸衍生物，环糊精和联二萘酚等 1.1纤维素衍生物手性固定相 1.纤维素-三（苯甲酸酯）（CTB）固定相 由微晶纤维素和苯甲酰氯反应： 2.纤维素-三（苯基氨基甲酸酯）（CTPC） 由微晶纤维素与异氰酸苯酯反应，将得到的纤维素-三（苯基氨基甲酸酯）涂敷在氨基键合的硅胶上，便得到CTPC手性固定相: 1.2 淀粉类手性固定相 最基本的有如下4种。 淀粉手性固定相的制备方法与纤维素手性固定相相似，首先用淀粉与相应的有机化合物，如苯甲酰氯，苯基异氰酸酯等反应，得到淀粉衍生物，再将这种衍生物涂敷在氨丙基键合硅胶上，便可以得到淀粉类手性固定相。 1.3 环糊精手性固定相 CD及衍生化CD化学键合手性固定相键合方式： 1.胺键连接 氨丙基硅胶键合相与环糊精反应： 2.酰胺键连接 羧基化的氨丙基硅胶键合相与乙二胺环糊精反应： 3.碳氧键连接 醚基键合相与环糊精反应，： 1.4 多模式环糊精固定相 环糊精衍生化固定相既可以用于反相分离又可以用于正相分离，因而称为多模式手性固定相。手性识别作用既有包容络合，又有π-π电荷转移，氢键和立体排斥相互作用等多种作用，应用范围广泛。 制备过程有四个步骤： （1）硅胶上键合N-（2-氨乙基-3-氨丙基）基团 （2）用对甲苯磺酰氯专一性的磺化环糊精的羟基 （ 3）2-氨乙基-3-氨丙基键合硅胶与甲苯磺酰氯-β-环糊精反应；通过N-（2-氨乙基-3-氨丙基）键合硅胶上的氨基与环糊精上的甲苯磺酰基之间发生反应，把环糊精链接到硅胶上 （4）环糊精上未反应的甲苯磺酰基与各种改性剂进一步反应，得到改性的环糊精键合固定相 1.5 刷型手性固定相 刷型手性固定相（CSP）是通过链烃基将手性有机小分子链接到硅胶载体上制得，又叫Pirkle型手性固定相。 刷型手性固定相的合成主要有两种途径，即含端羧基或异氰酸酯基的手性基团的化合物与氨基键合硅胶进行缩合反应，分别形成含酰胺型或脲型结构的手性固定相： 交互作用原理是对“刷型”手性固定相设计有重要指导意义的原则，即如果一个固定性的化合物A的对映体之一能对另一化合物B的对映体进行拆分的话，那么反之亦然。 刷型手性固定相有较好的色谱效能和对映体的识别能力，在高压下稳定性好，但是这类固定相一般只能在正相条件下使用，限制了它的应用范围。 1.6 蛋白质型CSPs 这类CSPs是利用蛋白质中的氨基或羧基将蛋白质键合到经修饰的硅胶上，修饰硅胶的官能团可以是环氧基、氨基或醛基等。 蛋白质型CSPs主要用于生物医学分析，表现出的对映体选择性较强，但对pH值、有机调节剂的含量变化十分敏感。 此类CSPs还有几个显著的缺点：负载量低， 进样量大于lμg就可观察到过载现象；对周围环境过于敏感，0.1单位的pH值变化就可 能导致容量因子20％的变化；稳定性差，必须使用预柱提高寿命；结构选择性差，很容易受干扰。 1.7其它类CSPs 1.配体交换类CSPs 当配体给出的电子能够进入过渡金属空的d轨道，就能形成金属配位络合物。这种配位络合物具有非常明确的几何形状，配体在空间只能占据某种给定的位置，配体交换手性色谱分离的机理就是基于此。 它一般是将氨基酸固定在载体上，在流动相中使用二价金属阳离子，当样品进入时，在键合氨基酸、二价金属阳离子和被拆分的对映体之间形成三元络合物，利用它们之间的热力学稳定性的不同进行拆分。 2.冠醚类CSPs 手性识别主要基于固定相“空穴”的主－客体络合和氢键作用。冠醚主体一般是取代联萘衍生物，联萘基团是手性选择体，能够通过与芳香胺以氢键或π-π作用形成络合物。含有较大取代基的冠醚有较好的手性识别能力。 主要用于分离胺、氨基酸及其衍生物的对映体 3.分子烙印聚合物类CSPs 分子烙印聚合物的制备，常用的方法是烙印分子与具有某种官能团的单体混合，单体在交联剂的作用下共聚,产生高度交联、刚性的共聚物。把烙印分子从聚合物中移去，在聚合物上留下与烙印分子在形状和官能团位置有互补性的识别点。 4.合成高分子化合物类CSPs 合成的旋光性高分子分为主链旋光和侧链旋光两种类型。旋光性高分子的合成方法一般有： （1）旋光性单体的聚合，或用不同的单体共聚； （2）将不对称中心引入到非旋光性聚合物的