巴西固氮螺菌Sp7中铁受体蛋白FhuE和杂合双组分蛋白Org35功能分析.pdfVIP

巴西固氮螺菌Sp7中铁受体蛋白FhuE和杂合双组分蛋白Org35功能分析.pdf

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摘要 brasilense)楚一秘联合圜懿菌,主要定麓在曩乏本科作物摄际表 巴嚣霹缀螺菠(Azospirillum 露。在巴西辫筑擦萤中,NifA蛋自是新蠢瀚氮基西(删萋戮)静转录激港鬣自。整在该蕊中,溉 没有发现类似FixL/FixJ双组分调节系统,也没有发现Nill蛋白。因此本实验蜜以NifA蛋白为诱饵, 利用酵母双杂交系统从巴西湖氮螺菌染色体DNA文库中筛选与NifA蛋白有直接相互作用的礞白, 共获褥4个攘荧虽鑫。本研究瓣其孛嚣个虽自Fh匹和O够5功8§研究。 辑斌嗣编码的蛋白与Escherichiacoti中豹铁受俸蛋RFhuE蛋自其有报高静弼源性,嗣源性 高达57%。E.coli的FhuE蛋白是氧化肟型铁躐体的受体蛋白,负责粪原因子形式铁裁体的逐输。 本研究表明,A.brasilense 8p7昀加虚基因编码粪原因子形式铁载体的铁受体蛋白,负责粪原因子 的吸收季l嗣。 or935怒个杂合的双缀努信号转导蛋自,包含三个结构区域,帮PAN结构域(PAS)、组氨酸 蟹白激酶区域(}Ⅱ墩)、响应调节蛋白区域(RR)。PAS结构域主要存在于一些直接或间接参与信 号转导的蛋白质中,充当传憋器区域,感受外界环境的变化,PAS结构域广泛地存在于双组分信 譬转导系绫警孛,蹩感受痿譬鹣重要方式。零砭究逶遘Or935羁NifA在援co/i中共弱表达、楚 作用。本研究利用酵母双杂交系统证明HPK和RR区域存在相互作用。 在E Or935豹鳃氨黢蛋壹激酶嚣域能够鑫我磷藏纯,劳嚣鼗蟛瓣磷酸基濯转送绘响痘调苓簧鑫嚣壤。 结果表明Or姻5的HPK区域和RR区域分别行使了组氨酸蛋白激酶和响应调节蛋白的功能。从 生化水平上,证实Or935是一个杂台双组分信号转导蛋白。 进一步磷究表嘿,Or935骚自参与细穗的生长和趋优,与细菌的趋氧、趋光、鞭毛形态、运 动缝等生褥擎符毪无关。or935萋嚣是一个多效基因。 关键诃:巴西圈氮螺菌,铁受体蛋自,杂食双组分蛋自,缎氦酸蛋自激酶,响应调节蛋黩 Abstract onthe isa bacteriumwhich lives brasilense normally Azospirillum gram-negative,nitrogen-fixing the ofthe surfaceofcereal roots.NifA,a activator,regulatesexpressionnitrogen grass transcriptional inthis FixL/FixJtwo norNi凡一like fixation bacterium.However,neithercomponentsystem 0功genes existsinA.brasllense.Four wereidentifiedfromthe libraries protein NifA—interactingproteins genomie ofA.brasilense functionsoftwoof and two-hybridsystem.The them,FhuEOre35, Sp7usingyeast in Dissertation. weredissectedthis

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