马铃薯纺锤形块茎类病毒spindletuberviroid2015年-ippc.pdfVIP

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2018-03-30 发布于天津
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马铃薯纺锤形块茎类病毒spindletuberviroid2015年-ippc.pdf

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马铃薯纺锤形块茎类病毒spindletuberviroid2015年-ippc

本诊断规程于2015 年1 月由标准委代表植检委通过。本附件是ISPM 27 号标准规定的一部分。 ISPM 27 附件7 国际植物检疫措施标准 ISPM 27 号标准诊断规程 DP 7 ：马铃薯纺锤形块茎类病毒（spindle tuber viroid ） (2015 年) 目录 1. 有害生物信息 3 2. 分类信息 4 3. 检测 4 3.1 抽样 7 3.2 生物学检测 7 3.3 分子检测 8 3.3.1 样品制备 8 3.3.2 核酸提取 9 3.3.3 马铃薯纺锤形块茎类病毒属的通用分子检测方法 11 R 11 用DIG 标记的cRNA 探针杂交 11 使用Verhoeven 等（2004 ）引物的常规RT-PCR 12 使用GenPospi 检测的实时RT-PCR （Botermans 等，2013 ） 13 3.3.4 具有较高特异性的PSTVd 分子检测方法 15 使用Shamloul 等（1997）引物的常规RT-PCR 15 使用Boonham 等（2004 ）引物的实时RT-PCR 15 实时RT-PCR （Plant Print Diagnòstics kit ） 16 3.4 分子检测的对照 17 3.5 常规和实时RT-PCR 结果的解释 19 3.5.1 常规RT-PCR 19 《国际植物保护公约》第1 页共32 页 DP 7 限定有害生物诊断规程 3.5.2 实时RT-PCR 19 4. 鉴定 19 4.1 测序与序列分析 20 5. 记录 21 6. 获取进一步信息的联系点 21 7. 致谢 22 8. 参考文献 22 第2 页共32 页《国际植物保护公约》限定有害生物诊断规程 DP 7 1. 有害生物信息类病毒是没有蛋白质外壳，共价闭合的单链环状 RNA 分子，长度为 239 －401 个碱基对，由寄主酶复制（Hammond Owens ，2006 ）。马铃薯纺锤形块茎类病毒（PSTVd ；马铃薯纺锤形块茎类病毒属（Pospiviroid ））通常长359 个碱基对，但有报道称有的 PSTVd 分离物含有 341 －364 个碱基对（Wassenegger 等，1994； Shamloul 等，1997；Jeffr