紫外可见光谱-4.ppt

* 5．参比溶液的选择 测量试样溶液的吸光度时，先要用参比溶液（空白溶液）调节透光度为100%，以消除溶液中其他成分以及吸收池和溶剂对光的反射和吸收的干扰。参比溶液主要有： （a）溶剂参比：试样组成简单、共存组份少（基体干扰少）、显色剂不吸收时，直接采用溶剂（多为蒸馏水）为参比； （b）试剂参比：当显色剂或其它试剂在测定波长处有吸收时，采用试剂作参比（不加待测物）； （c） 试样参比：如试样基体在测定波长处有吸收，但不与显色剂反应时，可以试样作参比（不能加显色剂）。 * 第二章 紫外可见吸收光谱分析法 一、 定性、定量分析 qualitative and quanti-tative analysis 二、 有机物结构确定 structure determination of organic compounds 第六节 分析方法与应用 Ultraviolet visible spectrometry, UV-vis Method and application of analysis * 一、定性分析 UV-vis 光谱比较简单，特征性不强，并且大 多数简单官能团在近紫外光区只有微弱吸收或 无吸收，所以在物质结构分析上有一定局限性。 但可用于鉴定共轭生色团和物质纯度分析等定性分析方面。 定性分析方法： 1）. 比较试样和标样的吸收光谱（或标准图谱）：形状、峰数、λmax位置与相应的εmax。 2）. 用经验规则计算λmax，然后与实测值比较。 * 1. 纯度鉴定 若在一种不吸收某波长紫外光的化合物中，混有在该波段有吸收的杂质，则容易检出。 如：甲醇中混有少量苯 若所测化合物和杂质在同一波段有吸收，则可根据λmax位置与相应的εmax，来对比检测出杂质。 肾上腺素中混有肾腺酮 纯甲醇 含苯的甲醇 * 2. 化合物结构的辅助分析： 紫外光谱法虽然不能反映整个分子结构，但可以用反映生色团和助色团结构，所以能够用来化合物结构的辅助分析。 例如： 推断化合物中共轭体系 推断共轭结构化合物的异构体。 * ?可获得的结构信息 （1）200-400nm 无吸收峰。饱和化合物，单烯。 （2） 270-350 nm有吸收峰（ε=10-100）醛酮 n→π* 跃迁产生的R 带。 （3） 250-300 nm 有中等强度的吸收峰（ε=200-2000）芳环的特征 吸收（具有精细结构的B带）。 （4） 200-250 nm有强吸收峰（ε?104），表明含有一个共轭体系（K）带。共轭二烯：K带（?230 nm）；????不饱和醛酮：K带?230 nm ，R带?310-330 nm * 立体结构和互变结构的确定 顺式：λmax=280nm； εmax=10500 反式：λmax=295.5 nm；εmax=29000 共平面产生最大共轭效应， εmax大 互变异构： 酮式：λmax=204 nm；无共轭 ? 烯醇式：λmax=243 nm * 再如，乙酰丙酮存在酮式和烯醇式两种异构体 在极性溶剂水中，以酮式异构体为主，形成分子间氢键，λmax为277nm； 在非极性溶剂己烷中，以烯醇式异构体为主，形成分子内氢键，λmax为269nm。 * * 依据：朗伯-比耳定律 吸光度： A= ? l c 透光度：-lgT = ? l c 灵敏度高： ?max：104～105 L· mol-1 · cm -1；（比红外大） 二、定量分析 重要应用：通过测量吸光度A值，根据吸收定律可以分析溶液浓度或者吸光组分含量。 * 1. 单组分定量分析 Step 1: 配制一系列不同含量的标准溶液，以不含被测组分的空白溶液作参比，在相同条件下测定标准溶液的吸光度，绘制吸光度——浓度曲线，该曲线就是校正曲线。 Step 2: 在相同条件下测定未知溶液的吸光度，从校正曲线上找到与之对应的未知试样的浓度。 注意:该方法必须要事先确定溶液浓度符合L-B定律的线性范围。 主要有标准对比法和校正曲线法两种。常用的是校正曲线法，其分析过程为 芦丁含量测定 0.710mg/25mL * 2. 多组分的定量分析 三种情况： 1） 两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 如右图，两组分a、b在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量。 * （2）两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 （a）解线性方程组法 （b）等吸收双波长消去法 （c）系数倍率法 * （a） 解线性方程组法 步骤： * （b）等吸收双波长法 如右图，消除a的影响测b 注：须满足