真核生物基因敲除的技术路线-西安电子科技大学.PDFVIP

真核生物基因敲除的技术路线-西安电子科技大学.PDF

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真核生物基因敲除的技术路线-西安电子科技大学

1 真核生物基因敲除的技术路线 构建重组基因载体 将重组DNA导入胚胎干细胞纯系中,使外 源DNA与胚胎干细胞基因组中相应部分发 生同源重组 重组载体中的DNA整合到内源基因组中, 并加以表达 2 高等动物基因敲除技术 分子生物学 夏玉琼 西安电子科技大学 目的 1 2 基因 棕色小鼠 tk neo 3 4a 同源重组 4a 4b 4c 4b 非同源重组 4c 未重组 5a 代替野生型基因 5a 5b 5c 5b 随机插入 5c 没有插入 6a 含插入基因的细胞 6a 6b 6c 6b 含随机插入的细胞 6c 不含插入的细胞 7 7 收集细胞 8 用抗生素G418和 8 丙氧鸟苷处理 3 分子生物学 夏玉琼 西安电子科技大学 在正常胚胎中植入 将胚胎植入待孕黑色母体 含插入基因的细胞 新生的雄性嵌合鼠(棕色-黑色) 野生的雌性黑鼠 成熟的雄性嵌合鼠(棕色-黑色) 杂合子 杂合子 纯合子,用于研究 4 基因捕获法

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