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- 2018-04-08 发布于天津
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什么是动物细胞培养
植物细胞工程常用的技术手段有哪些? 植物细胞与组织培养 植物体细胞杂交 那么动物细胞工程常用的技术手段呢? 温故知新 动物细胞与组织培养 动物细胞核移植技术 动物细胞融合 单克隆抗体制备 4 1 2 3 动物细胞工程常用技术手段包括 —基础 第三节 动物细胞工程应用 材料一:在治疗烧伤病人时,通常是取病人的健康皮肤进行自体移植。对于大面积烧伤的病人,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,且会产生排斥反应。怎样才能获得大量的自体健康皮肤呢? 材料二:许多动物细胞能分泌蛋白质,如抗体等。但是,单个细胞产生的蛋白质很少,怎样才能获得大量的分泌蛋白呢? 2、具体培养过程 (1)总结出具体的培养过程? (2)为什么要把动物组织分散成单个细胞? (3)什么叫细胞贴壁?什么叫接触抑制? (4)什么叫原代培养?什么叫传代培养? 任务:阅读教材第61-62页内容 问题: 1、什么是动物细胞培养,原理是什么? 自主学习 一、动物细胞与组织培养 (3)条件: 无菌 、温度适宜和营养充足 、pH等 (4)目的:使动物细胞或组织继续生长增殖并维持原有结构和功能。 1.概念 (1)材料:取自动物胚胎或出生后 不久的幼龄动物的器官或组织。 (2)场所:体外,模拟动物内环境 。 2.原理:细胞增殖 一、动物细胞培养与组织培养 2、具体培养过程 (1)总结出具体的培养过程? (2)为什么要把动物组织分散成单个细胞? (3)什么叫细胞贴壁?什么叫接触抑制? (4)什么叫原代培养?什么叫传代培养? 任务:阅读教材第61-62页内容 问题: 1、什么是动物细胞培养,原理是什么? 自主学习 一、动物细胞与组织培养 3、培养过程: (1)为什么要把动物组织分散成单个细胞?怎样分散成单个细胞的? 成块的组织中细胞与细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖。另外,单个细胞所需的营养容易供应,其代谢废物容易排出。所以需分散成单个细胞后培养。 胰蛋白酶 胚胎或幼龄动物器官组织 强调一:细胞贴壁过程 细胞贴壁:在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。 培养瓶或培养皿壁要求:表面光滑、无毒、易于帖附。 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。 强调二:接触抑制 思考: 1、胰蛋白酶处理动物细胞,说明动物细胞之间的物质主要是? 用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质 主要是蛋白质。 不行。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2~8.4。动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,胃蛋白酶在此环境中没有活性。 2、胰蛋白酶换成胃蛋白酶行不行? 胰蛋白 酶处理 胚胎或幼龄 动物器官组织 剪碎 单个细胞 细胞悬液 加培养液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 3.培养过程 传代培养 贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理让细胞继续培养,这样的培养过程通常被称为传代培养 通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养 (2)什么叫原代培养? (10代以内) (超过10代) (3)什么叫原代培养? 注意: 10代以内原代培养的细胞,生物学特性最接近体内组织和细胞,适合做药物测试等 胰蛋白 酶处理 胚胎或幼龄 动物器官组织 剪碎 单个细胞 细胞悬液 加培养液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 细胞株 细胞系 (遗传物 质未改变) 遗传物 质已改变 3.培养过程 传代培养 (4)什么细胞株?什么是细 胞系? 细胞株 传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了变化,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,可能在培养条件下无限制的传代下去,称细胞系。 从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞称细胞株,其遗传物质没有发生变化,一般能传到40-50代。 细胞系 1、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体? 不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体 2、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在10代以内,为什么? 10代以内的细胞遗传物质不改变。 思考: 细胞 悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 细胞贴壁生长 随细胞增多,出现接触抑制 部分细胞癌变,失去接触抑制,无限传代 小结 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 胰蛋白酶 剪碎 单个细胞 加培养液 细胞悬浮液 10代 细胞 50代细胞 原代培养 传代培养 细胞贴壁 分瓶培养 3.培养过程(笔记) 无限传代 细胞株 细胞系 1、动物细胞培养都需要满足什么条件? 任务:再次阅读教材第62页 问题: 自主学习 2、动物细胞培养都需要满足什么条件,动物细胞培养基的类型以及特点? 3、动物细胞培养有哪些应用? 4、动物细胞培养条件 无菌、无毒的环境 (添
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