分子生物学4CH4.Gene Transcription and讲解材料.ppt

转录终止： 目前对真核基因转录了解较少， RNApolⅠ的转录产物是大分子RNA，经剪切加工成成熟rRNA ； RNApol Ⅱ的初级转录产物经加工后为mRNA； RNApol Ⅲ的体外转录与体内转录产物具有相同的末端，因此是研究真核基因转录终止的较好对象。 SV40的终止有类似与大肠杆菌的转录终止子（不依赖于p因子），转录产物形成发夹结构，末端有一串U，终止序列产物中有特定的剪切和修饰信号。 真核基因转录后的加工 1.真核基因转录产物的特点： 含内含子，需经剪接去除； 需要修饰（加帽、加尾，稀有碱基）； 转录和翻译是两个相对独立的过程。 2.加工类型: 加帽、加尾 修饰——甲基化、酰基化 剪接 RNA编辑 3.RNA加工的意义： 活化——使无活性的前体RNA加工成有活性的成熟RNA；（rRNA、tRNA的剪接、修饰） 改变基因的编码产物——同一转录产物，不同剪接方式，编辑方式，蛋白产物不同； 调节方式——加工会影响RNA的活性、半衰期、运输等，影响RNA功能的发挥； NTS区的作用：转录起始识别 含启动子序列——核心元件 人位于-45 ~ +20 小鼠-39 ~ +9 3’端含增强子—— -150 ~ -170bp间 上游调控区（UCE） 5’端转录终止序列 包含了起始位点，决定转录起始 明显增强核心启动子的转录活性， 决定转录强弱 非洲爪蟾非转录区的结构 类型II基因调控区：由三部分组成 核心元件区：——决定是否转录 由-30bp左右的TATAbox和起始位点（INR）组 成 上游调控区UPE： 具多种调控元件 CCAAT框、GC框、GCCACACCC框等，含其中一种或多种，决定转录强弱（转录活化和转录起始频率），启动子的强弱起决于UPE的类型。 决定转录起始的选择，绝大多数真核基因 正确表达所必需 确定真正的起始位点 Sequence elements within a typical eukaryotic gene1 GC TATA CAAT GC -25 -50 -80 -95 -130 1 based on the thymidine kinase gene octamer transcription element promoter TATA box (TATAAAA) located approximately 25-30 bp upstream of the +1 start site determines the exact start site (not in all promoters) binds the TATA binding protein (TBP) which is a subunit of TFIID GC box (CCGCCC) binds Sp1 (Specificity factor 1) CAAT box (GGCCAATCT) binds CTF (CAAT box transcription factor) Octamer (ATTTGCAT) binds OTF (Octamer transcription factor) +1 ATTTGCAT 调控区的模块模型（调控因子模块） 调控区由一些独立的功能元件组成，每个单元约7~20bp的小段，这些序列又称模块（元件）。每个元件可以与一种或多种转录调控因子结合，多个元件组合构成某个基因的调控区。 启动子：多个元件，从特定的位点以一定方向 指导RNA合成； 增强子：若干元件作为整体促进远端的转录。 RNA聚合酶II启动子 远端调控区： 位于转录起始位点更上游；如β –珠蛋白基因的远端调控区在-1300 — -3300间 增强子：使与它连锁的基因转录频率明显增强的DNA序列，作为基因表达的重要调节元件。 特点： 1.增强效应明显（10 – 200倍）； 2.增强效应与其位置和取向无关； 3.大多为重复序列，一般50bp； 4.增强效应有严密的组织和细胞特异性，只有特定的蛋白质（转录因子）参与才能发挥其功能； 5. 没有基因专一性。 作用机制：通过改变模板DNA的整体结构（影响DNA-Pro复合物的结构或改变DNA超螺