番茄红素产业化技术讲解研究.ppt

番茄红素合成的影响因素 ① 温度 35℃时，不能生成；温度再高时甚至已形成的番茄红素还会分解； ② 光照 番茄红素的积累受果实中光敏色素调控，适度的光照有利于植物组织中类胡萝卜素的合成；但在黑暗条件下，只要保持通气和适宜的温度，番茄红素仍能形成。表明番茄红素的生成对于光的要求不是完全必要的； Harding and Shorpshire 光促进成熟时的番茄果实中类胡萝卜素(主要是番茄红素)合成 Thompson and White 光可诱导光合作用复合体的形成，间接促进番茄红素的形成。 Rau et al 光敏色素影响叶子和果实中类胡萝卜素的生物合成 Alba et al 红光照射番茄果实后，番茄红素积累增加，这可为嗣后的远红光逆转。这表明番茄果实中番茄红素的积累受果实中光敏色素调控 ●Mn2+影响PSY八氢番茄红素合成酶的活性； ● Mn2+是决定GGPP用来合成类胡萝卜素关键性调控因子，对植物类胡萝卜素的合成至关重要； ● 2,6-二苯基吡啶和达草灭抑制PDS八氢番茄红素合成酶等抑制有色类胡萝卜素的合成； ●三乙基胺类物质 2- ( 4-硫代氯苯)-三乙基胺盐酸盐(CPTA) 等可抑制番茄红素beta-环化酶(LYC)的活性； ●乙烯与番茄红素合成相互依赖。12℃下气调贮藏的番茄果实无乙烯生成，也检测不到番茄红素；而当果实移入室温并置于正常大气中，随后乙烯即生成，番茄红素也开始合成。 ③ 某些化学物质 提高微生物中番茄红素的方法（三孢菌除外发酵法） ●传统菌种诱变选育技术 ● 基因工程手段 基因敲除 RNA干扰技术 代谢途径中酶的增强或抑制（含代谢流控制方法） 转基因技术 三孢布拉霉菌产番茄红素技术研究 -1 -2 -3 -12 -11 -6，-7 -8 -5，-7 -4 -9 -13 -14 -16 -15 更多…… (1)大孢子囊 孢囊孢子 正、负株的孢囊孢子形态相近，褐色、花生果形，大小为 ( 12.6～13.9 )×( 5 .0～5 .7 ) μm。 孢囊孢子两端有成束、无色的附属丝； 表面有清晰的由隆脊构成的条纹。 孢囊孢子的附属丝是其表面纹饰的隆脊间的镶嵌物。 大孢子囊产 生的孢囊孢子比小孢子囊产生的孢囊孢子稍大。 正株的纹饰较直且相互平行 负株的纹饰多数不直且有内凹、呈不连续状 1. 无性繁殖 三孢布拉氏霉的正、负株的无性繁殖基本相同。孢子先萌发形成芽管，芽管延伸并大量分枝逐步形成营养菌丝、 气生菌丝和孢囊梗， 孢囊梗头部发育形成大孢子囊和小孢子囊。 2. 有性生殖 异宗配合；当正、负株在同一平板内培养时， 两种菌丝相接触后各自产生许多短的、 球茎状的侧生分枝， 配囊柄头部的配子相结合而发育成接合孢子。 多核菌株的选育及遗传稳定性 ① 显性突变 容易被多核体等位基因覆盖; ② 隐性突变 三孢布拉霉菌在整个生长周期内均为多核体，高产bete-胡萝卜素（或番茄红素）的高产菌株是由两个CarS和CarD突变基因中任一突变而产生的，而CarS和CarD两者均属隐性突变，多核体的存在对隐性突变的分离造成了相当的障碍。 ③ CarS隐性突变体的分离解决方法 研究采用100μg/mL大剂量亚硝基胍诱变1×106个/mL孢子悬液，处理时间为30min, 存活率降到1%以下，但存活下来的孢子是功能上的单核体。 三孢布拉霉菌菌种的退化 随着菌体传代次数的增加，菌体生长速度降低，菌丝变细，容易发生断裂，发酵菌丝颜色不均匀，黄、红、白杂交在一起，使beta-胡萝卜素产量不断下降。此结果表明，在多核体中优良性状的遗传极不稳定，隐形突变性状也极易在多次传代中淹没在杂乱的遗传群体中。 三孢布拉霉菌的老化性状 ①三孢布拉霉菌的老化伴随着胡萝卜素的消失; ②胡萝卜素的消失发生在老化的早期可能是菌株老化的标志; ③老化性状在三孢布拉霉的老化菌株和正常菌株之间的传递是明显和迅速的; ④而老化性状在正常菌株的孢囊孢子之向的传递，菌丝之间, 菌丝与孢子之间; ⑤老化菌丝体内存在着可转移的老化因子的可能性; 参考：张建法, 黄为一, 吴江. 三孢布拉霉菌的老化性状传递特征初报. 菌物系统. 16(1):57~60,1997 老化因子可能的作用机制 ①老化因子可能在核酸水平上影响胡萝卜素合成酶，从而使菌体由于胡萝卜素的消失而表现为衰老; ②老化因子的作用可能直接影响整个代谢过程; ③其他因素也可能导致菌株的胡萝素含量的变化，从而使得菌株抗衰老能力发生改变 真菌中胡萝卜素的存