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一个B淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞杂交瘤细胞化学性质单一
植物组织培养和动物组织培养的比较 比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 理论基础 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的 获得细胞或细胞分泌蛋白 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 快速繁殖、培育无病毒植株等 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 液体培养基 固体培养基 细胞增殖 六、动物细胞的培养和克隆形成 2、广义的动物组织培养(组培)包括? 细胞培养、组织培养和器官培养。 1、动物细胞培养和组织培养之间的关系如何? 动物组织培养过程中可伴随组织,细胞分化 二、动物的细胞融合技术及其应用 诱导方式 物理法:离心、振荡、电融合技术 化学法:聚乙二醇 生物法:灭活的仙台病毒 1、细胞融合与细胞杂交: 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通,细胞膜连接 细胞融合,形成杂种细胞 2.杂交瘤技术和单克隆抗体制备: (1).传统抗体生产方法: 抗原 动物体内 抗体 刺激 效应B (抗体不纯) 筛选单一效应B细胞 不能增值,产生大量抗体 特异性差、纯度低;产量低、反应不够灵敏。 (2).单克隆抗体制备过程: 设计方案: 一个B淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 + 化学性质单一、特异性强的抗体。 特性: 主要用于制备单克隆抗体 获得杂种植株 用 途 物理、化学方法 (同左) 灭活的病毒 物理(离心、振荡、电刺激) 化学(聚乙二醇) 诱导方法 使细胞分散后诱导细胞融合 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞融合的原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌的实验方案 2、该方案能达到预期效果吗?为什么? 4、图中B为________过程,常用_________作为诱导剂,该细胞继承___________的遗传特性,既能__________,又能___________。 1、该实验方案的目的是__________ 3、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______ 5、C过程指细胞培养,该过程包括_____培养和_____培养两个阶段,其中_____代以内的的细胞属于细胞株。 制备单克隆抗体 效应B细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 原代 传代 B 体外培养 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 足够数量的细胞群 注射到 小鼠腹腔 A C 三、动物的克隆繁殖 1、动物细胞全能性的表现程度: 低等动物细胞的全能性一般比较容易体现。 无论是分化还是癌变,变化的都是表现型,基因组成的完整性并没有改变。 癌细胞仍能逆转为正常细胞。 按分化潜能分: (1)全能干细胞:具有形成完整个体的分化潜能。如胚胎干细胞。 (2)多能干细胞:具有分化出多种细胞组织的潜能,失去发育成完整个体的能力。 (3)专能干细胞:只能向一种类型或密切相关的两种类型分化的细胞。如骨髓干细胞、皮肤生发层细胞等。 按来源分: (1)胚胎干细胞:当受精卵分裂发育成囊胚时,内层细胞团的细胞即为胚胎干细胞。 (2)成体干细胞:指已分化特定组织中的未分化细胞,可来源于胚胎、胎儿和成人的组织中,如造血干细胞、神经干细胞、成肌细胞等。 干细胞的分类: 2、动物难以克隆的根本原因: 基因表达的调控使得细胞中合成了专一的蛋白质。 一类基因是维持生存的; 一类基因随着组织器官和发育阶段不同而选择性表达。导致基因组中的基因活动不完全. 如:哺乳动物的红细胞只 有少量的线粒体。 3、细胞核移植实验和动物的克隆繁殖: 胚胎细胞核的移植成功率远高于成体细胞。 绵羊“多莉”克隆过程: 涉及的技术: 核移植 胚胎移植 克隆羊成功的分子细胞生物学机理: 体细胞克隆成功的意义: 1、证明了高度分化的细胞也可以回复到类似受 精卵时期的功能。 2、证明了细胞质具有调控细胞核发育的作用。 应用: 为遗传疾病的治疗、优良品种的培育等提供了重要途径;对濒危动物的保存也有重要意义。 重组移核细胞丢失了源于乳腺细胞的调节蛋白,经过三次分裂后,原乳腺细胞的调节蛋白便全部被卵细胞质中的蛋白因子替换了,因此核DNA被重新编排,细胞开始表达自己的基因。 * 为什么进行动物细胞培养?获取细胞或细胞分泌蛋白 * * 低等动物细胞的全能性一般比较容易体现。癌细胞仍能逆转为正常细胞。 第3节、动物的克隆 1、动物细胞培养 (一)动物细胞、组织培养培养 将动物体内的一部分组织取出 分散成单个细胞 人工控制的条件下 细胞得以生存并保持生命活动现象 生长、分裂乃至接触抑制和有规律的衰老、死亡性能等 机械消化或胰酶消化 (1)定义 (二)动物细胞的培养过程 取动物胚胎 或幼龄
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