试验四巴氏杆菌病的试验室诊断.PPTVIP

1．要掌握显微镜的使用和保养 2．实验完毕要对病料进行无害化处理 3．实验室彻底消毒干净，以防病原扩散 掌握巴氏杆菌病的临床诊断方法 临床症状观察 病理变化观察 掌握巴氏杆菌病实验室诊断方法 组织的病理学触片 细菌分离 动物实验 进一步了解禽巴氏杆菌病的临床症状和病理变化，掌握巴氏杆菌病的临床诊断方法 以肝组织制触片，染色镜检观察组织中巴氏杆菌的形态 以家禽为实验动物，自然死亡或人工感染家禽致死后，以肝组织接种于血琼脂平板，培养后观察巴氏杆菌的菌落形态。 临床症状观察、剖检、取材 镜检 病原分离培养。 实验材料：禽霍乱发病或死亡的鸡 剖检：观察病变，重点观察心脏、肺、肝脏、肌胃和十二指肠 取材：主要为心血、肝脏和脾脏，用于镜检和病原分离鉴定。 鸭，禽霍乱 病例呈现全身充血的败血症 鸭，十二指肠有环带状出血性坏死 组织涂片和血涂片的制备 革兰氏和瑞氏-姬姆萨染色 巴氏杆菌的镜检特征 1、滴加瑞氏-姬姆萨A液（约0.5～0.8ml）于涂片上，并让染液覆盖整个标本涂片染色1分钟； 2、再将瑞氏-姬姆萨B液滴加于A液上面（滴加之量为A液的2～3倍），以嘴或洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状，使两液充分混合，染色(3～10分钟）。 3、水洗（冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲去，以防有沉渣沉淀在标本上），干燥、镜检。 将病料分别接种于血琼脂平板和麦糠凯琼脂平板在37oC进行培养 多杀性巴氏杆菌在血琼脂上呈较平坦、半透明的露滴样菌落，不溶血 将病料研磨成糊状，用灭菌生理盐水稀释成1：5~1：10乳剂，接种于实验动物皮下或肌肉内，剂量为0.2~0.5mL 猪、牛、羊等家畜的病料可用小鼠或家兔 家禽的病料可用鸽、鸡或小鼠。