微生物的培养基1.PPT

下表关于四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢的类型，描述正确的是 四：营养基配制的原则 1：目的要明确 配制培养基要根据 培养的微生物、培养的目的、培养基的用途来确定培养基的化学成分、物理状态。 2：营养要协调 3：PH要适宜 请观看培养基的配制过程 G:\生物课件\培养基的配制.mp4 常用的灭菌方法 常用的消毒方法 平板划线分离微生物的原理：连续划线。由于划线后，线条末端的细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能 得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 注意事项：第一步以及每一次划线之前和划线结束后都要灼烧接种环。灼烧接种环要冷却后再划线。每次划线之间灼烧接种环的目的是杀死上一次划线残留的菌种，使下一次划线的菌种直接来至于上一次划线的末端，使每一次划线的菌种数目减少。 稀释涂布平板法分离微生物的原理：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂平板表面，经过培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成单个细胞，在培养皿表面形成单个菌落。 微生物的纯化技术 G:\生物课件\微生物的纯化方法.mp4 练习题 用稀释平板法统计菌落时，最好选择菌落数在 的平板进行计数。若统计在某一稀释度为10-5的3个平板上的菌落数分别是46、42、47个，涂抹平板所用稀释液的体积均为0.5mL，则每ml样品中细菌的数为 。 2.涂布平板法操作过程 取少量菌液（0.5ml）在酒精灯火焰附近滴加到平板表面 从酒精溶液中取出涂布器，把涂布器上面粘附的酒精在酒精火焰 上引燃灭菌 把用涂布接种的培养皿在37度恒温条件下培养12天取出 在酒精灯火焰附近，用 冷却的涂布器把菌液涂 布均匀 主题：分离土壤中分解尿素的微生物 1、原理： 分离：以尿素为唯一氮源的选择性培养 基进行选择。 计数方法：稀释涂抹平板法 2、实验步骤： 思考：如何将菌液由1倍稀释成10-6？ 注意事项：使用的水有何要求？ 用移取菌液的移液管是否要灭菌？ 问题：统计细菌和统计分解尿素所用的细菌的稀释倍数相同吗？ 细菌：4、5 、6 放线菌：3、4、5 真菌 2、3、4 问题：统计的菌落数往往比活菌实际数目偏低？ 每克样品中的菌落数 =C（菌落数）* M （稀释倍数）/ V（涂布体积） 思考：灭菌的温度、压力、时间分别是多少？ 8 .搁置斜面/倒平板（斜面的长度不超过试管的1/2) 图中哪些措施是防止杂菌污染的？ 培养基灭菌后，需要冷却到50度左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 刚刚不烫手。 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 防止瓶口附近的微生物污染培养基 平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 使培养基表面的水更好的挥发，防止皿盖上水珠落入培养基 在倒平板的过程中，不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 空气中的微生物会在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，最好不要用该培养基培养微生物。 六、无菌操作 1、获得纯净培养物的关键： 2、无菌操作 避免杂菌感染操作对象的操作过程 3、哪些地方有菌可能导致菌体感染？ 操作者 培养基、接种工具、器皿 空间 防止外来杂菌的入侵 4、灭菌和消毒 消毒：温和的因素杀死一部分对人体有害的微生物。 举例：煮沸，70%酒精溶液 问题：一段时间后为什么会腐败？ 不包括芽孢和孢子 灭菌：强烈的因素杀死所有微生物，包括芽孢和孢子。 思考：哪些因素可以灭菌、消毒？ 物理——高温、紫外线 化学——酒精、氯气、石碳酸 种类 主要方法 应用范围 灼烧灭菌 酒精灯火焰灼烧 接种针、接种环或其他金属用具，接种过程中的试管口、三角瓶口 干热灭菌法 电热鼓风干燥箱160～170℃加热1～2h 培养皿、试管、移液管等玻璃制品和金属制品不适宜用其他方法灭菌而又耐高温的物品 高压蒸汽灭菌 压力100Kp、121℃维持15～ 30分钟 培养基及多种器材、物品 种类 主要方法 应用范围 巴氏消毒法 60～85℃下处理30～35分钟、 牛奶、啤酒、果汁等不宜高温灭菌的液体 煮沸消毒法 100℃沸水浴 日常食品、灌装食品 紫外线消毒法