深圳大学理科选修《生物安全与人类生活》课件 第九章 生物技术药物生物安全.ppt

第九章 生物技术药物 生物安全 一、生物技术药物简介 1、概念 生物技术药物是指应用基因工程，蛋白质工程，抗体工程及细胞工程技术制造用于治疗、预防和诊断的药物，主要包括治疗性多肽、蛋白质、激素、酶、抗体、细胞因子、疫苗、可溶性受体以及核酸类药物等。 生物技术、信息技术、新材料技术、新能源技术一起并列为21世纪影响国计民生的四大科学技术支柱产业。 * 2、生物技术药物类别 1）基因工程药物 细胞因子 干扰素（IFN-?，?，?） 白细胞介素（IL-1） 集落刺激因子（G-CSF, GM-CSF） 生长因子 其它细胞因子（EPO，TPO，SCF，ANP，BNP，凝血因子，Endostatin） 激素（Ta1，T?4，Insulin） 酶类（tPA，SK，SAK，SOD，DNase） 重组疫苗和重组多价疫苗（HBV，HCV，HEV，CMV，HPV，HIV，HSV，EBV，cholera） * 重组融合蛋白 细胞因子间融合蛋白：IFN-?/IL-2、IFN-?/TNF-?、IL-2/IL-6、GM-CSF/IL-3 细胞因子/抗原（抗体）融合蛋白：Id/GM-CSF、Id/IL-2、Id/IL-4，细胞因子部分可提高Id部分的抗原性 细胞因子/毒素（抑制因子）融合蛋白：白喉毒素/IL-2、GM-CSF/LIF 人用单克隆抗体 鼠源抗体——Orthoclone, Zevalin、嵌合抗体——Rituxan, Remicade、人源化抗体——Herceptin, Avastin、全人抗体——Humira 2）病毒工程突变株与重组减毒活疫苗 工程减毒疫苗株——脊灰减毒疫苗Sabine Ⅲ 杂合减毒株——用Sabine Ⅲ的N-AgⅠ的8肽（EPQTTRVO）替代Ⅰ型病毒的8肽（SASYKNKD），获得的杂合病毒能诱发小鼠、兔和猴子针对Ⅰ、Ⅲ型病毒的双重中和抗体 * 病毒载体重组株——脊灰病毒载体、腺病毒载体、痘苗病毒载体、用于疾病治疗的重组病毒 3）反义核酸药物 4）基因治疗 5）DNA疫苗 6）转基因动物 7）转基因植物生产药用蛋白 二、生物技术药物的生物安全性问题 生物技术药物在研究与生产过程中涉及病毒、细菌等多种病原体的传播载体，这些具有极大生物危险的感染性致病因子，无论是直接感染，还是间接地散播到环境中去，对人类社会、动物或植物都是一个现实的或潜在的危险。因此应强化生物制药企业的安全意识，提高相关实验室的安全管理能力。 * 1、研究过程的生物安全问题——参见第十一章 2、生物技术药物生产过程的生物安全问题 感染危险：即接触活菌体或病毒而使人、动物及植物发生疾病； 生产过程中的死菌体或死细胞及其组分或代谢产物对人体及其它生物造成的毒性、致敏性及其它生物学效应； 产品的毒性、致敏性及其它生物学效应； 环境效应，尤其是遗传工程体的后处理问题。 内源性的生物安全问题 原核表达系统的安全性问题 —— 纯度、糖基化、蛋白序列 真核表达系统的安全性问题——纯度、致癌性，致癌性可以从活基质细胞、细胞蛋白、残留细胞DNA、内源病毒（如逆转录病毒）等4个方面考虑 * 基因工程药物的生产过程 获得目的基因 构建基因工程菌 工程菌大规模培养 产物分离纯化 除菌过虑 半成品检测 成品加工 成品检测 * 重组活疫苗的安全性问题——普遍认为，在天花和减毒脊髓灰质炎疫苗的应用中，肯定发生过不经意的扩散。 质粒DNA疫苗的安全性问题——注射的DNA可能整合到宿主染色体中，导致插入性突变；抗原表达时间控制无法掌握，若长期表达可导致免疫病理反应；接种质粒DNA可导致宿主体内高水平抗DNA抗体，诱发异常的自身免疫反应；体内合成的抗原可能含有不需要的生物活性 基因治疗的生物安全性问题 逆转录病毒载体的安全性问题——随机性整合、病毒载体复制缺陷性的改变 目的基因表达水平对机体的影响——缺乏对导入基因的表达量控制 靶细胞被污染的潜在危险——包装细胞系可能产生复制型的病毒形式，导入靶细胞后导致靶细胞被污染 * 生产过程的风险 病原体培养过程风险分析 体积较大的样本或浓度较高的弱毒菌株病原微生物制备品，实验可能产生较大量的气溶胶，或操作本身危险性较大，需要额外的预防措施，提高防扩散装置的防护水平。 减毒活疫苗制备过程风险分析 活疫苗在规模化生产制备过程中，所生产出的减毒活细菌数量或病毒数量是极其巨大的，如同时在同一生产车间进行生产可能造成相互间污染。 灭活疫苗与毒素制备过程风险分析 灭活疫苗与毒素的制备存在大规模活菌培养与灭活后制品制备两个阶段。 芽胞菌类疫苗制备过程风险分析 多数制备疫苗的芽胞菌对人无致病性或致病力轻微，但如果缺少有效的灭活手段或不能与其他制品的生产严格分开，其扩散对环境与同一区域生产的其他制品可能构成威胁。 * 生产过程中用过的物品的风险分