用均匀设计优选栀子柏皮汤半仿生法提取的工艺条件.docVIP

用均匀设计优选栀子柏皮汤半仿生法提取的工艺条件 154天津中医药2011年4月第28卷第2期 TianjinJournalofTraditionalChineseMedicineApr.2011,Vo1.28No.2 用均匀设计优选栀子柏皮汤 半仿生法提取的工艺条件术 荆汉卫,孙秀梅2张兆旺27黄延亮 (1.山东中医药大学研究生,济南250014;2.山东中医药大学,济南250014) ? 中药研究? 摘要:[目的]优选栀子柏皮汤半仿生提取工艺条件.[方法]采用均匀设计法,在方药规格,煎提温度,煎提用水 量,滤过,浓缩等条件相同的情况下,以分子量≤1000u提取物,栀子苷,小檗碱,甘草次酸,总生物碱为指标,综合评 判,优选该方药半仿生提取的工艺条件.[结果]3煎用水的pH值依次为2.0311,7.4955,8.4193,3煎总计时间为 4.0162h.【结论】结合实际生产,确定3煎用水的pH值依次为2.0,7.5,8.5;提取时间依次为2,1,lh. 关键词:栀子柏皮汤;半仿生提取法;均匀设计;综合指标 中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1672—1519(2011)02—0154—04 栀子柏皮汤源自《伤寒杂病论》,由栀子,黄柏, 甘草组成.在美景度评判(SBE)法研究取得较多 成果的基础上,本实验以栀子柏皮汤为模型,分子 量≤1000u提取物为最终产物,对该产物作栀子苷, 小檗碱,甘草次酸,总生物碱的测定,综合分析评判, 优选该方药用SBE法提取较佳的工艺条件. 1仪器与药品 精密pH计(PHS一3C型,上海雷磁仪器厂);电 子分析天平(MAI10型,上海第二分析仪器厂);高 效液相色谱仪(1100系列,美国AgiLent公司);紫外 分析仪(UV3010型,日立公司);医用超声波清洗器 (KQ一250E型,昆山市超声仪器有限公司);中空纤 维超滤膜(DH一系列,上海德宏生物医学科学科技发 展有限公司). 方药经山东中医药大学张兆旺教授鉴定:栀子 为茜草科植物栀子(GardeniaasminoidesEllis.)的干 燥成熟果实;关黄柏为芸香科植物黄檗(PheLLoden— dronarnurenseRupr)干燥树皮的机切丝片;甘草为 豆科植物甘草(GyrrhizauralensisFisch.)干燥根及 根茎的机切厚片. 对照品栀子苷(批号:110749—200613),盐酸小 檗碱(批号:111595—200604),甘草次酸(批号:723— 9002)均购自中国药品生物制品鉴定所,甲醇,乙腈 均为色谱纯,水为超纯水,其余试剂均为分析纯. 基金项目:国家科技部国际科技合作项目(2007DFA31180). 作者简介:荆汉卫(1986一),男,硕士研究生,研究方向为申药 新药研发与中药炮制原理研究. 通讯作者:孙秀梅. 2实验方法与结果 2.1实验方法为保证实验的可比性和可重复性, 在饮片规格,煎煮温度,煎煮用水量,滤过,浓缩等条 件相同的前提下,确定考察的主要因素及水平,见 表1.选用均匀设计U.(91x3)表f中国航天工业总公 司第三研究院提供)安排实验方案,见表2. 表1因素与水平 Tab.1Factorsandlevels 因素 水平 123456789 第1煎pH(A)2.002.503.003.504.004.505.005.506.00 第2煎pH(B)6.506.506.507.007.007.007.507.507.50 第3煎pH(C)8.008.008.008.508.508.509.009.009.00 煎煮时间h(D)2.002.002.003.503.503.505.005.005.00 表2U.(91x3)实验设计表 Tab.2U9(91x3)Experimentaldesigntable 注:括号内数字依次为第l,2,3煎的煎提时间. 2011年4月第28卷第2期天津中医药 Apr.2011,Vo1.28No.2TianjinJournalofTraditionalChineseMedicine155 2.2样品液的制备按处方比例称取方药粗粉 (10～20目之间)47.5g,照表2布点实验,常压下加 热回流提取3次(溶剂量依次为方药重量的10,8, 8倍;浸泡30rain),分别将3煎提取液依次粗滤,离 心(3500r/min,25min),一定规格的中空纤维膜滤 过,合并,浓缩,定容至100mL,得样品液SBE.(质 量浓度为475g/L). 2.3供试液的制备精密吸取2.2项下样品液 SBE各10mL,分别置蒸发皿中,水浴浓缩至近 干,加硅藻土2.5g,拌匀,蒸干,研匀,移至具塞锥 形瓶中,加甲醇l0mL,密塞,称质量,超声提取 30min,放冷,补足失质量,抽滤,定