分选座谈讲座 zenglingwu.ppt

;FACS Sorting Applications;Agenda;Agenda;百年BD 全球足迹;百年BD 持续创新;百年BD 业务广阔;百年BD 胸怀社会;生物科学学科起源;BD生物科学：行业领袖 不断创新;BD生物科学：产品丰富 客户广泛;BD流式细胞仪产品系列 ;BD生物科学——流式整体方案提供者;专职工程师35人;专职工程师35人;Agenda;流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM）是一种快速、准确、客观检测流动状态中单个细胞多项物理及生物学特性，加以分析和分选的技术。 速度快 在极短时间内可分析大量细胞，每秒钟上十万个细胞的速率进行测量。 多参数 多角度了解细胞的特性、功能、变化和相互作用等。 样本多样 各种细胞（如外周血，骨髓，实体组织，悬浮或贴壁培养的细胞），微生物，人工合成微球等。 分选 可分选感兴趣的任何亚群，高活力、高纯度;样本类型;可检测颗粒大小;*;*;About FACSTM;流式细胞仪能检测哪些信息?;Lasers;*;Agenda;流式细胞术在临床和科研中的应用;FACS Application;FACS Application;11色，13参数流式细胞术：从细胞表型，功能，和T细胞受体多样性来鉴定Na?ve T细胞 －－发表于Nature Medicine;Antibody panel;FACS Application;Tracing Dye(CFSE);胞内细胞因子检测;九色分析－T细胞表面标记和胞内细胞因子;细胞周期的分析;Cyclin蛋白表达与细胞周期;FACS Application;Measurement of Intracellular Calcium Ions;Violet/Blue的比率作为参数，使得细胞和细胞之间的变异系数在5％－10％之间，非常适合于检测微量细胞的变化。而且比率直观反应[Ca2+]i的变化，不受细胞大小，染料多少影响 细胞毒性小，有报道Indo-1对于human Tcell和Murine Bcells的增值活性没有影响，因此可以应用于分选不同[Ca2+]i的细胞群体;Protocol;图形分析;膜电位检测;BD? MitoScreen (JC-1);BD? MitoScreen (JC-1) - Sample Data;BD? MitoScreen (JC-1) - Sample Data;FACS Application;荧光报告蛋白检测反映基因转染效率;RFP的最佳激发光线，实现了GFP与RFP的同时检测 ;FRET：Fluorescence Resonance Energy Transfer;FACS Application;从CBA到CBA Flex Set－从六种因子的检测到70种因子的检测;BD CBA Flex Set 数据: ;从可溶性蛋白的检测－－信号转导蛋白的筛选9-Plex for Measuring T Cell Activation;Kinetics of Jurkat Cell Activation With Anti-CD3/CD28;Monitoring the T Cell Activation Pathway by CBA (Control);Monitoring the T Cell Activation Pathway by CBA (PD-98059);Monitoring the T Cell Activation Pathway by CBA (PP2);Agenda;FACS Sorting Application;Flow Cell;BD SORP FACSAria 特殊分选;点对点分选 ---ACDU装置（Auto cell disposal unit）;Pre-Sort;Post-Sort;最短的时间处理更多的样本和数据分析：信号获取与数据分析速度;最短时间分选出更多的细胞：最快的分选速度;最大限度的纯化细胞：最高的分选纯度;大鼠胰岛β-细胞分选;GFP阳性转染细胞分选;转基因拟南芥精原细胞分选;保证获取到最大限度的细胞回收：最高的回收率和活性（恒温保护细胞或生物颗粒）;保证获取到最大限度的细胞回收：最高的回收率和活性（恒温保护细胞或生物颗粒）;Purification of sperm（精原细胞） and vegetative nuclei（营养核） by FACS.;Markers and Methods for Cell Sorting of Human Embryonic Stem Cell-Derived Neural Cell Populations;人乳腺癌SP细胞分选（百分之一）;CD133+结肠癌细胞分选（万分之五）;斑马鱼体细胞分选（