微生物工程复习提纲.docVIP

第一部分：微生物工程原理（14-176） 1.一般菌种分离纯化和筛选的步骤 如下：标本采集--标本材料的预处理—富集培养—菌种初筛—菌种复筛--性能鉴定—菌种保藏七个步骤。 2.代谢调节的方式多种多样，主要包括反馈抑制、反馈阻遏、酶的诱导调节、酶的共价修饰等。 3为了达到这一目的（见课本），可以采用两种方式：一种就是通过各种育种方法，选育基因突变株，从根本上改变微生物的代谢；另一种是控制微生物的各种培养条件，影响其代谢过程。 4葡萄糖效应：葡萄糖能够抑制其他糖的利用，只有在葡萄糖利用完之后，才开始用其他的糖。在利用其他糖时，有一生长停滞期，是利用第二种糖的酶合成的时期。这种酶诱导的阻遏现象最初以为只限于葡萄糖，因而被称为葡萄糖效应。后来发现所有可以迅速利用或代谢的能源，都能阻遏异化另一种被缓慢利用能源所需酶的形成，故称为分解代谢产物阻遏。 5发酵条件的控制：各种发酵条件对微生物代谢的影响；使用诱导物；添加生物合成的前体；培养基成分和浓度的控制。（详细见课本） 6磷酸盐对次级代谢产物合成抑制作用的调节机制是不同的，有的是通过抑制酶的作用，有的是导致细胞能荷变化，或是提高磷酸盐竞争某些必需金属离子的作用实现的。 7代谢工程：指利用基因工程技术，定向地对细胞代谢途径进行修饰、改造，以改变微生物的代谢特性，并与微生物基因调控、代谢调控及生化工程相结合，构建新的代谢途径，生产新的代谢产物的工程技术领域。 8改变代谢途径有各种方法，如加速限速反应、改变分支代谢途径流向、构建代谢旁路、改变能量代谢途径等不同方法。 9一般来说，优良的生产菌种应该具备如下的基本特性： 生产菌种应具有在较短的发酵周期内产生大量发酵产物的能力。 在发酵过程中不产生或少产生与目标产品性质相近的副产品及其他产物。 生长繁殖能力强，有较强的生长速率，产生孢子的菌种应具有较强的产孢子能力。 能够高效的将原料转化为产品。 有利用广泛来源原材料的能力，并对发酵原料成分的波动敏感性较小。 对需要添加的前体物质有耐受能力，并且不能将这些前体物质作为一般的碳源利用。 在发酵过程中产生的泡沫要少，这对提高装料系数、提高单罐产量、降低成本有重要意义。 具有抗噬菌体感染的能力。 遗传特性稳定。 10诱变育种：利用各种被称为诱变剂的物理因素和化学试剂处理微生物细胞，提高基因突变频率，再通过适当的筛选方法获得所需要的高产优质菌种的育种方法。 11诱变育种包括诱变和筛选两个部分，诱变部分成功的关键包括出发菌株的选择、诱变剂种类和剂量的选择，以及合理的使用方法。 12菌种的保藏方法很多，其基本原理都是根据微生物的生理生化特性，人为地创造条件，使微生物处于代谢不活泼，生长繁殖受到抑制的休眠状态，以减少菌种的变异。 13菌种的保藏方法：斜面保藏法和穿刺保藏法、沙土管干燥保藏法、真空冷冻干燥保藏法。（详见课本） 14培养基的成分大致分为碳源、氮源、无机盐、微量元素、特殊生长因子、促进剂、前体和水等几大类。 15前体：某些化合物被加入培养基后，能够直接在生物合成过程中结合到产物分子中去，而自身的结构并未发生太大变化，却能提高产物的产量。这类小分子物质被称为前体。 16温度对发酵的影响是多方面且错综复杂的，主要表现在对细胞生长、产物形成、发酵液的物理性质和生物合成方向等方面。 17发酵热的测定（详见课本96） 18在抗生素发酵中，细胞生长和代谢产物积累的最是温度往往不同。（判断题） 19最适温度的选择实际上是相对的，还应根据其他条件进行合理的调整，需要考虑的因素包括菌种、培养基成分和浓度、菌体生长阶段和培养条件等。 20PH对发酵的影响（详见98） 21发酵过程中，ph的变化是微生物在发酵过程中代谢活动的综合反映，其变化的根源取决于培养基的成分和微生物的代谢特性。此外通气条件的变化、菌体自溶或杂菌污染都可能引起发酵液ph的变化。 22氧的传质方程式：ORT=KLa(C*-Cl)(详见105) 23微生物的耗氧速度常用单位质量的细胞（干重）在单位时间内消耗氧的量，即比耗氧速率（或呼吸强度）来表示。当氧是限制性基质时，比耗氧速率为Qo2=（Qo2）m*CL/(K0+CL))(详见课本106) 24单位体积培养液，在单位时间内消耗的氧量称为摄氧率。摄氧率与比耗氧速率有如下关系：r=Qo2*X 25各种微生物的呼吸强度是不同的，并且呼吸强度是随培养液中的溶解氧浓度的增加而加强，直至达到一个临界值为主止。 26研究培养基的流变特性是因为它直接影响动量、热量和质量等的有效传递，继而影响到各种发酵条件，如溶氧速率、气体交换、发酵温度、营养物的补充、ph的调节等等。 27牛顿性流体服从牛顿粘性定律，其主要特征就是其粘度u只是温度的函数，与流变状态无关，因此是一常数（如气体、低分子的液体或溶液）。 28影响KLa